Ｌ－天冬氨酸结晶过程探究.pdfVIP

￡_天冬氨酸结晶过程研究 吴月 范伟平欧阳平凯 (南京化工大学生物工程与科学系 南京210009) j奇姜本文从分子构型变化的现点，分析了漓加，调节溶液pH对L-Asp溶解度的影响，研究 了晶种的加入量和H：s0．的滴加速度对L-Asp结晶动力学的影响．确定了间歇冷却探作曲线． 关t词卜天冬氧酸等电点结晶冷却结矗 氨基酸的精制多采用反应沉淀结晶的方法，共通用的方法是调pH值至等电点沉淀法。在工 业生产中，这是一个混合反应沉淀结晶和冷却缕晶过程的耦合过程。而关于反应沉淀结晶和冷 却结晶耦合过程的文献鲜有报道。7本文对工-ASp：的结晶过程作了研究，莺点研究解决L-Asp反 应沉淀结晶过程中过饱和度过大。晶体颗粒细枣聚团的问题，为工艺优化设计和工业化生产提 供了技术基础数据，同时也为类似的通过调pH值控制生化产品结晶过程动力学的研究，提供了 有价值的基础数据。 1材料与方法 ‘ 1．1实验材料 1 L-Asp酶转化液，经活性炭脱色处理，浓度为23％，pH为8．87。 ‘ 1．2实验方法 随加酸量的变化，作pH值变化哇Il线。 ： 1．2．2 oC)，过滤，干 加入一定量的晶种．再滴加40％巩s04至溶液pH为2．8，控温冷却至室温(30 ’ 1 “ ’。“ ’ 燥至恒重。 2结果与讨论 。 2．1邸吼调pH值沉淀L-AsP机理‘ 在等电点沉淀结晶过程中，蹦旨酸的加入，反应液的 pH值始终在变化之中，而pH值与L—Asp的溶解震又有着 密切的关系。测定L．Asp转化液的pH随加酸量昀变化曲 1 线。实验结果见图1。 1 吾 由图l可以看到，转化液的阳由8．87变化到2．8， 曲线上存在2个较为明显的拐点，’分别在p_H=4．§和 pHi3．7处。这两点拐点将曲线分∞三段。当加醺量小于 4ml，即结晶液中的口H值高于4．3：时，酸量的微小变化， 就会导致溶液的pH值急剧下降，箍在这段时间戌没有晶 volumc of40％H≈SOo(m1) 体析出。继续加酸，结晶液中开始有晶体析出。H2S04的 图I DH值随加酸量的变化曲线 滴加量在4～lOml时，随着酸量的增加，溶液中的pH值变化 却变化不大，仅从4．3下降到3．72，滴定曲线中出现～个平台。这一过程产生的过饱和度大，因 此析出大量晶体。当加酸量大于lOml，随着酸量的增加，pH明显下降，但下降的速度不及第一 段那么快。 之所以会出现这种变化，主要是由于L—Asp在溶液中的分子构型发生了改变。 对于L-Asp来说，其离解过程如下： +f00“ +i00一 +00一 ’00一 洲弋H 当}bN弋H；垒毫洲1H 型。必弋H }H，。i雨。 }l-h专i产*亏袁6扣 伪H COOH C00 C00 R+ F R- 席 L-Asp是双羧基氨基酸，而转化液中有过量的NH，与水形成水合分子NH,OH，在pH值为 的形式存在。 随着硫酸的加入，在第一阶段．：pH随之剧烈下降。