空心莲子草致病菌分离、鉴定及其致病效果研究.pdfVIP

第 32卷 第 5期 佛 山科 学技术 学 院学报 （自然科 学版 ） V o l.3 2N o.5 2 0 14 年 9 月 JournalofFoshanUniversity （NaturalSciencesEdition ） S e p.2 0 14 文章编号 ：1008-0 17 1（20 14 ）05-00 11-03 空心莲子草致病菌分离、鉴定及其致病效果研究 何丽烂 ，陈乐辉 ，王 芳 （佛 山科 学技术学院 园艺系，广 东 佛 山 528000 ） 摘要 ：从 自然发病的空心莲子草 中分离出 9 种菌株 ，经鉴定菌株 B、D 分别为不 同的链格孢菌 ，菌株 C 为粉孢菌 ， 菌株 F 为尖孢镰刀菌 ，菌株 G 为串珠镰刀菌 ，菌株 E、I 为未知真菌 ，A 、H 均为细菌。 将分离得到的菌株接种到健 康 的空心莲子草上 ，结果表 明，在供试 的 9 个菌株 中，菌株 F（尖孢镰刀菌 ）对空心莲子草有较强 的抑制作用 ，其 次为菌株 B（链格孢菌 ），接种 9d 后 的病情指数分别为 46.69%和 17.33%。 关键词 ：空心莲子草 ；致病菌 ；鉴定 中图分类号 ：S459 文献标志码 ：A 空心莲子草（Alternanthera p hiloxeroides Griseb ），又名喜旱莲子草 ，是苋科 （Amaranthaceae ）莲子草属 多年生宿根草本植物。 它原产于巴西 ，现已遍及美洲、澳洲、亚洲及非洲的许多国家和地区。 空心莲子草生 ［1］ 命力极强 ，生长繁殖迅速 ，是我国许多地区的恶性杂草之一 。 在我国，防除空心莲子草的主要措施是化学 防除，使用效果较好除草剂有草甘膦、使它隆及复配剂水花生净。 由于大量施用除草剂不可避免会造成环 境污染［2-3］，因此 ，利用微生物防除空心莲子草的研究开始被重视起来。 比如向梅梅等（1999 ）分离出了对空 心莲子草有抑制作用的莲子草假隔链格孢菌（Nimbya alternantherae），并对其生长和产孢条件进行了探索［4］； ［5］ 万佐玺等发现链格孢菌（Altermaria alternata（Fr ）Keissler ）的毒素对空心莲子草有很强的致病作用 。 本研究对 自然发病 的空心莲子草病原菌进行 了分离 ，目的是筛选 出高致病性 的菌株 ，为开发空心 莲子草新型除草剂提供实验依据 。 1 材料与方法 1.1 试验材料 空心莲子草 ，采 自佛山科学技术学院园艺基地 。 1.2 试验设计 1.2.1 菌株的分 离与鉴定 将采集到的材料用 自来水冲洗干净并在蒸馏水 中浸泡 2 ～3h 后取出。 在空心莲子草叶片剪 5mm2 的小块组织 ，用 75%酒精浸泡 30s、无菌水换洗 4 次后 ，移入马铃薯琼脂 （PDA ）平板上培养 。 28 ℃培养 3d 后 ，挑取小块组织边缘未污染 的菌丝 ，再次移入 PDA 平板上培养 。 无污染 的菌株移入 PDA 斜面培 养 ，编号备用 。 在培养得到的微生物菌落 中挑选单菌落再分离培养 ，镜检 ，根据菌体形态特征进行鉴定 。 1.2.2 致病菌株的筛选 将分离获得 的菌株分别接种 PDA 平板上培养 7d 后 ，用无菌水 冲下 ，稀释至 100mL ，用喷雾器喷 洒到健康 的空心莲子草植株上 ，设 3 个重复 ，每个重复 20 株 ，3 天喷一次 ，连喷 3 次 。 接种材料于室温 收稿 日期 ：20 14-0 1-10 作者简介 ：何丽烂 （1973- ），女 ，广东河源人 ，佛 山科学技术学院高级实验师 。 12 佛 山科 学技术学院学报（自然科 学版 ） 第 32 卷 （25 ℃）下保湿 24h ，取出后观察记录发病情况 ，每天记录存活的叶片总数