酶法尿素检测试剂的改进及性能评价.pdfVIP

·３９０· 检验医学２０１４年４月第２９卷第４期　ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ａｐｒｉｌ２０１４，Ｖｏｌ２９．Ｎｏ４． 文章编号：１６７３８６４０（２０１４）０４０３９００４　　中图分类号：Ｒ４４６．１　　文献标志码：Ａ　　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３８６４０．２０１４．０４．０２１ 酶法尿素检测试剂的改进及性能评价 李俊华 （陵县人民医院检验科，山东 德州２５３５００） 　　摘要：目的　建立一种改良酶法尿素测定试剂，并评估其性能。方法　采用酶法测定尿素反应前后吸光度 （Ａ）值的变化率并对试剂进行改良，评估其性能。同时与现有酶法试剂及进口和光试剂进行比较。结果　现有 试剂空白Ａ值为１．８，空白Ａ值变化率为－０．００１８；改良试剂空白Ａ值为１．８，空白Ａ值变化率为－０．００１９；和 光试剂空白Ａ值为 １．６，空白Ａ值变化率为 －０．０００４。现有试剂检测限为 ０．０３５ｍｍｏｌ／Ｌ、改良试剂为 ０．０１４ｍｍｏｌ／Ｌ、和光试剂为０．０７５ｍｍｏｌ／Ｌ。分析敏感性现有试剂为 －０．０４，改良试剂为 －０．１３，和光试剂为 －０．０５。改良试剂对高、低值血清的批内精密度分别为０．４５％和０．８５％，批间精密度分别为０．３８％和０．７１％， 线性浓度范围为０～３８ｍｍｏｌ／Ｌ；改良试剂与和光试剂方法学比对的回归方程为Ｙ＝０．９３Ｘ＋０．４１（ｒ＝０．９９９），估 计偏倚低于允许误差；３４２ ｍｏｌ／Ｌ结合胆红素、３４２ ｍｏｌ／Ｌ非结合胆红素、０．０３ｇ／Ｌ维生素Ｃ、５ｇ／Ｌ血红蛋白、 μ μ １４５０ＦＴＵ乳糜对改良试剂高、低值样本检测结果均无干扰。结论　改良酶法尿素试剂具有更加优越的检测限 和分析敏感性，并且自身性能良好，符合相关临床应用要求。 关键词：尿素；酶法；性能评价 　　尿素是人体内氨基酸代谢的终产物，构成了 （简称和光试剂）购 自日本和光公司（批号 血液中绝大部分的非蛋白氮，在肝脏内合成，经肾 ＴＬ９５３）。 脏排泄到尿中，因此其含量取决于蛋白质的摄入、 ４．校准品　改良试剂和现有试剂校准品均购 ［１］ 蛋白质分解代谢及肾功能 。尿素可自由地从 自罗氏公司（批号１６９５１２０１）。和光试剂校准品 肾小球滤出，因此是反映肾功能的敏感指标。本 为试剂盒自带。 研究对现有酶法尿素检测试剂进行了改良，并对 ５．仪器　日立７１８０全自动生化分析仪（日本 其性能指标进行了评估。 日立公司）。 二、方法 材料和方法 反应温度为３７℃，比色杯光径为１．０ｃｍ，检测 一、试剂与仪器 主波长３４０ｎｍ，副波长４０５ｎｍ，样本（校准管以校 １．现有试剂　试剂１（Ｒ１）：１００ｍｍｏｌ／Ｌ三羟 准品做样本）加Ｒ１混匀，孵育３～５ｍｉｎ后加入Ｒ２ 甲基氨基甲烷缓冲液（ｐＨ值７．８），８ｋＵ／Ｌ尿素酶， 混匀，孵育１．５ｍｉｎ后连续检测３ｍｉｎ吸光度（Ａ） ０．５ｋＵ／Ｌ谷氨酸脱氢酶，１．５ｍｍｏｌ／Ｌ二磷酸腺苷， 值变化。其中样本用量５ Ｌ，Ｒ１用量２００ Ｌ，Ｒ２ μ μ ０．８ｇ／Ｌ叠氮钠；试剂２（Ｒ２）：１００ｍｍｏｌ／Ｌ三羟甲基 用量５０ Ｌ，根据仪器使用说明及分析参数编制检