EV71入侵人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞机制的初步研究.pdfVIP

一 50 一 重庆医科大学学报2015年第4O卷第 1期 (JournalofChongqingMedicalUniversity2015．Vo1．40No．1】 DOI：10．134060．cnki．cyxh．000341 EV71入侵人神经母细胞瘤sK—N—sH细胞机制的初步研究 郭晓丽，刘泉波，张祯祯，毛华伟 (重庆医科大学附属儿童医院感染科、儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室、儿科学重庆市重点实验室、 重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地，重庆 400014) 摘【 要】目的：初步研究肠道病毒71型(enterovirustype71，EV71)入侵人神经母细胞瘤SK—N—SH细胞的机制。方法：将临床 EV71分离株接种于人横纹肌肉瘤 (rhabdomyosarcoma，RD)细胞 ，扩增和纯化病毒；MTr法检测不同病毒胞吞途径阻断剂对sK— N～SH细胞生长抑制作用；用特异性的化学阻断剂预处理靶细胞后。TaqManreal—timePCR验证其对EV71mRNA表达的影响。 结果 ：RD细胞能够成功扩增出EV71病毒，病毒滴度为 1x10sTCTD，。。随着药物浓度梯度的增加，SK-N—SH细胞的生长增殖受 到抑制。TaqMan荧光定量 RT—PCR结果显示氯丙嗪(chlorpromazine，cPz)能够抑制EV71mRNA的表达(P0,05)，制霉菌素 (nystatin，NT)对其影响不大(P0．05)。结论：初步推测EV71入侵 SK—N—SH细胞是通过网格蛋白依赖性的内吞作用入胞。 【关键词】肠道病毒71型；人神经母细胞瘤细胞；网格蛋 白；内吞途径 【中图分类号]R373．2 文【献标志码】A 【收稿 日期】2014-02—13 Mechanism ofenterovirus71enteringintohumanneuroblastomacells GuoXiaoli，LiuQuanbo，ZhangZhenzhen，MacHuawei (DepartmentofInfection，theChildren’sHospital，ChongqingMedicalUniversity；MinistryofEducationKey LaboratoryofChildDevelopmentandDisorder；KeyLbaoratoryofPediatricsinChongqing；Chongqins InternationalSciencenadTechnologyCooperationCenterforChildDevelopmentandDisorders) A【bstractlObjecfive：Toresearchthemechanismofenterovirustype71(EV71)enteringintohumanneuroblastomasK—N—sHce11s Methods：IeclinicalEV71isolateswereinoculatedfrom hu— 作者介绍：郭晓丽，Email：guoxiaoli912@sina．com， manrhabdomyosarcoma(RD)cellsforamplifyingandpurify- 研究方向：EV71入侵易感宿主细胞机制的研究。 ingvirus．MTrassaywasconductedtodetecttheeffectofdi卜 通信作者：刘泉波，Email：Liuqb1223@sina．corn。 基金项 目：重庆市 自然科学基金资助项 目(编号：este2012jjAO160)。