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·扬州· 第十六次全国动物遗传育种学术讨论会论文集 ·401·
利用88H技术分离海南黑山羊肌肉发育相关基因
徐铁山,周汉林,顾丽红
(中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所,海南儋州 571737)
引育
海南黑山羊具有肉质细嫩、膻味小的特点。肌肉的发育是受一系列基因共同调控的,在基因组范围内进行肌肉
sAGE可以同时分析几千个已知基因的表达情况,但这两种方法需要知道所研究的基因序列,对于低表达量基因的
分析效果也不理想,而SSH技术不需要知道基因的背景情况,对低表达量基因更有效。因此,本研究选择了SSH技
术对海南黑山羊背最长肌发育过程中的基因表达情况进行了研究,以期寻找到与山羊肌肉发育相关的基因。
材料与方法 ‘
分别选择2月龄和24月龄发育正常的纯种海南黑山羊公母各4只,屠宰后立即无菌采集背最长肌组织样品
并投入液氮中保存备用。用Takara公司的RNAiso
plus试剂盒提取各组织总RNA。SSH的正库以2月龄海南黑山
结果
与已知核酸序列存在不同程度的相似性,其中95条与已知的mRNA序列存在相似性,通过与核酸数据库的BLAST
白定位在膜上。14%位于细胞内,13%位于细胞膜内侧,由此可见,大部分注释的Unigenes编码蛋白位于膜上;在功
关,另有3条与神经系统病变有关,
讨论与结论 7
差异表达基因主要涉及能量代谢、肌肉收缩、信号传导、蛋白合成及分解等方面。海南黑山羊肌肉发育最快的
时间是2月龄左右,肌肉的生长发育需要大量的能量,因此,本研究分离到了许多与能量代谢有关的基因,其中有
些基因是在肌肉组织中特异表达或者高表达的,如与能量代谢有关的CA3基因。伴随着肌肉的快速发育,与肌肉
组成有关的蛋白也快速积累。因此。从2月龄海南黑山羊背最长肌组织中分离的肌肉特异性结构基因也最多.这与
海南黑山羊肌肉发育的特点相吻合。本研究也分离到了多个与肌肉发育相关的调控基因,如跗Dc2,加日J.跗yDJ
等。
关键词:海南黑山羊;肌肉发育;SSH;基因表达
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