止喘胶囊对实验性哮喘动物模型气道重建地研究.pdfVIP

学术论文 止喘胶囊对实验性哮喘动物模型气道重建的研究 上海中医药大学附属在经华医院呼吸内科(200032) 林琳要全保于素霞指导 吴银根 补肾健脾方剂“止喘胶囊”是我院吴银根教授根据传统中医理论结台多年临床实践经验制定的防治哮 喘的经验方。它具有补肾纳气．健脾化痰，固本平喘的作用，用于临床已取得了初步疗效。为了进一步探 讨止喘胶囊对慢性哮喘气道重建的影响，我们设计建立了大鼠慢性哮喘动物模型，并对其气道组织形态进 行观察分析。 一、材料和方法 选用雄性sD大鼠50只．体重2009±209，由上海中医药大学实验动物中心提供。 卵白蛋白(Albumin E。Vi． 由上海生物制品研究所提供；兔抗人纤维粘连蛋白(Fibrinogen)即用型单抗，免疫组化DAKO 甲醛等若干。 止喘胶囊由仙灵牌，巴戟天等数味药物按比例提炼浓缩为流浸膏．制成胶囊，每粒含生药5如由龙华 医院提供。必可酮气雾剂每揿含丙酸倍氯米松50ug，重庆葛兰索威康制药有限公司产品。 方法 50只实验用大鼠随机分为5组，每组10只：正常对照组；模型组；止喘胶囊大剂量模型组；止喘胶囊 小剂量模型组；必可酮组。 参照文献的方法““1建立大鼠慢性哮喘模型，除正常对照组外，第1天各组大鼠每只腹腔分左右各注 天，以激发哮喘。第22—35天除正常对照组外，各组大鼠分别胃饲止喘胶囊169／kg体重／天．止喘胶囊 第29—35天除正常对照组外．在给药同时以1％卵蛋白气溶胶超声雾化吸入20分钟．激发哮喘。第3s 天晚开始禁食不禁水．第35天处死大鼠，搜集标本。 标本采集 大鼠肺组织用10％甲醛固定24小时．酒精梯度脱水，石蜡包埋，切片约6em厚。然后对大鼠肺组织 切片进行(1)胶原染色，染色步骤参照文献中胶原纤维的染色新方法”1改进。图象分析气道壁胶原含量 (积分吸光度A值．阳性染色面积，气道总面积)。(2)Fn免疫组化．染色步骤采用Envision System二步 面积／气道总面积)。(3)HE染色。染色步骤参照龚志锦等的方法”j，用测微尺测量并分析气道内径与外 径比例，图象分析气道内腔面积与气道总横截面积比倒。最后进行统计学处理，采用单因素方差分析法。 二、结果 正常组气道壁薄，Fn很少，粘膜完整，胶原染色着色浅，染色面积小；模型组气道壁明显增厚．Fn含量 明显增多．牯膜明显肿胀，胶原染色着色重，染色面积大；大剂量组气道壁薄，Fn无明显增加．粘膜完整．胶 原染色着色及染色面积均与正常组相似；小剂量组气道壁有增厚，Fn增加较明显，粘膜有一定的肿胀，气 道壁胶原染色着色面积增大；必可酮组与正常组相近(见照片1—10)。气道腔内／外直径比和面积比值． 组和必可酮组的结果相近(P0．05)，小刘量组则与模型组差异无显著性(P0．05)。(表1—2) 33 学求论文 表1气道内／外直径比值fX±S) 组别 动物数(只) 气遭内径／外径 A正常对照组 10 0733±0．062 B模型组 10 0612±0．090 c大剂量组 lO 07l7±0．080 D小剂位组 10 0．683±0．109 E必可酮组 10 0．