雷酚萜甲醚抑制人胃癌细胞AGS增殖及诱导凋亡作用研究.pdfVIP

中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletirt2014Aug；30(8)：1066～72 网络出版时间：2014-7—1016：51 网络出版地址：h即：／／www．cnki．net／kcms／doi／10．3969／j．issn．1001—1978．0214．08．1307．html 雷酚萜甲醚抑制人胃癌细胞AGS增殖及诱导凋亡作用研究 张丽静，张蕾蕾，黄文华，高 丽，霍小位，刘冬羽，李立勇，曹 丽 (中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所，北京 100193) doi：10．3969／j．issn．1001—1978．2014．08．007 目前尚无特效药物，因此，有效药物的发现迫在眉 文献标志码：A 文章编号：1001—1978(2014)08—1066—07 睫。目前，临床抗肿瘤药物的60％来源于植物、海 中国图书分类号：R284．1；R329．24；R329．25；R735．202．2； 洋生物及微生物类的天然产物 j。雷公藤 (Tripter． R979．1 giumwilfordiiHook．f)是卫矛科一年生藤本植物，是 摘要：目的 研究雷酚萜甲醚 (TME)在体外对人 胃癌 AGS 我国传统医学中的常用中草药。有研究表明其具有 细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法 采用 MTr法观察 抗炎以及抗肿瘤等活性 J。雷酚萜 甲醚 (triptonot- TME对人 胃癌AGS细胞、正常人 胃黏膜上皮细胞 GES一1的 增殖抑制作用；克隆形成实验观察细胞克隆的形成；光镜下 erpenemethylether，TME)是从雷公藤的根皮提取物 及AO／EB染色观察细胞形态；流式细胞术检测细胞凋亡和 中分离得到的二萜类化合物。有研究发现，TME对 细胞周期；JC·1染色和DCFHD·A荧光探针分别检测TME对 人宫颈癌 HeLa细胞和小鼠成纤维细胞 L929具有 AGS细胞线粒体膜 电位的改变和活性氧产生的影响；West— 抑制作用，表明TME具有潜在抗肿瘤活性，但其抗 el31blot检测凋亡蛋白caspase一3、easpase-8和Bel-2、Bax表达 肿瘤机制没有进一步的研究报道 J。 情况，以及 caspase广谱抑制剂 z-VAD—fmk对 caspase-3、 本课题使用多种肿瘤细胞筛选TME抑制细胞 caspase一8蛋白表达的影响。结果 TME可明显抑制人 胃癌 增殖的活性，结果显示 TME对人 胃癌AGS细胞的 AGS细胞的增殖，并诱导其凋亡 ，作用48h时Ic。为23．85 抑制作用明显，并且对正常人 胃上皮细胞 GES一1的 i．Lmol·L～，而对正常人 胃黏膜上皮细胞 GES一1的抑制作用 增殖抑制作用较弱，因此，对TME抑制人 胃癌AGS 明显低于AGS。TME能够抑制AGS细胞克隆形成 ，并使细 细胞的增殖作用及机制进行了进一步的研究。 胞出现明显的凋亡形态改变。AnnexinV—FITC ／PI双染实 1 材料与方法 验表明，随TME剂量的增加，细胞凋亡百分数也增加。JC．1 1．1 材料 和DCFH—DA结果显示，TME使细胞 内线粒体膜电位降低、 细胞 内活性氧水平增加。Westernblot结果显示，TME增加 1．1．1 实验药物 雷酚萜 甲醚(C：H，。O。)由中国 了Bax／Bcl一2的比例，激活caspase一8和caspase-3，并且加入 医学科学院北京协和医学院药用植物研究所黄文华 z—VAD-fmk后，caspase-3、caspase一8蛋 白的表达降低。TME 老师提供。用二甲基亚砜 (DMSO)溶解，配