破伤风双胨干粉产毒培养基配方探索进展.pdfVIP

综述 破伤风双胨干粉产毒培养基配方探索进展 邵 卉孙景致恩文山郭福全 北京天坛生物制品股份有限公司北京 摘要 目的 在破伤风双胨产毒培养基中利用月示胨与酪蛋白胨两种干粉培养基对新鲜牛肉胃酶消 化液与新鲜酪蛋白胰酶消化液进行替换调整相应的培养基成分与控制后期产毒培养从而设计出一种合 理便捷高效的破伤风双胨产毒培养基的干粉配比方案 方法 按照不同配比方案制备出不同的产毒培 养基 经历菌株接种种子扩大培养产毒培养三个阶段其中在后期产毒培养过程中进行不同方案的培养 基补液最终通过毒素絮状实验对破伤风产毒定量检定 结果 使用月示胨与酪蛋白胨两种干粉参与配比 的破伤风双胨产毒培养基且在产毒培养后期分别向培养基中补加 谷氨酰胺 或 猪肝 浸液 硫酸锌 使得破伤风杆菌产毒单位相对稳定均达到 结论初步建立了 破伤风双胨产毒培养基的干粉替代方案以达到此培养基制备的标准化 关键词 破伤风杆菌破伤风双胨产毒培养基月示胨酪胨 破伤风毒素是破伤风梭菌产生的神经毒素它 的批量生产带来不便 因此分别选用示胨与酪蛋白 是至今已知的最毒的毒素之一 由 个氨基酸 胨干粉培养基将两种基础液进行替换使得整个破 的组成分子量 为获得高价破伤风类毒 伤风产毒培养基的制备工艺能够更简化精确有益 素需用营养丰富且能刺激毒素形成与增长的培养 于大批量生产的标准化是获取破伤风毒素的最优 基 因此在获取破伤风毒素的工艺中大多选取以蛋 选择 白水解液为基础再添加适当氨基酸与维生素的培 蛋白胨的主要用途是供给细菌需要的氮源其 养基 目前使用酪蛋白胰酶消化液与牛肉胃酶消化 特点为 易溶于水 不因受高热而凝固且可被 液作为基础液制备的破伤风产毒培养基虽然能够达 细菌直接利用以助生长 系两性电解质固有缓 到相对稳定的产毒量但其制备工艺繁冗原材料不 冲作用 胃蛋白酶分解蛋白质的结果可得到含 可标准化由此带来的不可确定因素较多给培养基 有蛋白分子较大的碎片的产物月示和胨此外还 有较少量的低级多肽类和游离氨基酸 胰蛋白酶消 酰胺 猪肝浸液 硫酸锌分别添加 化的蛋白制品的特点是其成分有很多游离氨基酸 到不同编码的破伤风杆菌双胨干粉产毒培养基中 特别是色氨酸含蛋白胨较少在细菌生长时易于被 类毒素絮状单位实验 利用 按照实验设计的加量梯度精密量取抗毒素分 在分批发酵补料分批发酵和连续发酵三种微 别加入 只絮状反应管中精密量取 供试品快 生物发酵工艺中补料分批发酵已被广泛采用因为 速准确加入上述各絮状反应管 内 匀 置于 它的技术介于分批发酵和连续发酵之间兼有两者 水浴中连续观察并记录絮状出现的次