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374中国棉花学会2008年年会论文汇编 棉蚜羧酸酯酶与有机磷抗性的分子机制研究进展 杨子山 (中国农科院棉花研究所，河南安阳455000) 摘 要：介绍了棉蚜抗药性与羧酸酯酶的相关性。概述了棉蚜羧酸酯酶的生化特性、抗药性机制。对 国内外近年来对棉蚜抗药性相关羧酸酯酶基因结构和作用等的研究作了总结，以期为棉蚜抗药性研 究和治理提供参考。 关键词：棉蚜；水解酶；羧酸酯酶；抗药性；基因 还分泌蜜露加剧霉菌发乍繁殖、影响叶片光合作用和污染棉纤维。长期以来，其防治一直以化学防治 为主。由于棉蚜世代历期短、发生量大、不合理用药等原冈，其抗药性发展很快。多年来的研究表明， 乙酰胆碱酯酶(AchE)和羧酸酯酶(CarE)在棉蚜抗药性中发挥着重要作用。 Van 1959年研究有机磷抗性家蝇CarE时发现，其活性低于敏感品系， Asperen和Oppernoorth 提出了“脂族酯酶突变理论”。在有机磷抗性印度粉蛾、家蝇、铜绿蝇、棉蚜、胡蜂中也发现了CarE的 活性存在差异，证实铜绿蝇(Lucillia cuprina Glyl37一Asp的突变是导致抗性产生的原因，而且在家蝇、胡蜂中，也证实存在酯酶基因的突变。近 年来，棉蚜CarE与杀虫剂分子抗性及相关基因克隆与突变位点分析方面也取得了很大进展。本文 在前人基础上，对国内外棉蚜CarE与抗药性及相关基因的新研究成果作一概述，以期为棉蚜抗药性 机理与治理研究提供参考。 1 棉蚜CarE与抗药性的关系 孙耘芹等、慕立义等先后对有机磷抗性棉蚜研究发现，羧酸酯酶活性存在差异，抗性品系该酶活 性高于敏感品系的。随后，赵颖等、李飞等的研究也得到了相似的结果。而且赵颖等通过对终点测定 法和酶动力学测定法的比较认为，酶动力学法的测定结果更可靠。另外，谭维嘉等认为，棉蚜对溴氰 菊酯的不敏感性与水解酶之间也存在着一定的相关性；随着不敏感性的增加，棉蚜体内羧酸酯酶活力 有所增高；棉蚜抗性种群存在高异质性。 2 抗性棉蚜羧酸酯酶生化特性与有机磷抗性分子机理 2．1 抗性棉蚜羧酸酯酶生化特性研究 可能是因为CarE基因的突变或基因的扩增或突变与扩增的联合作用；带型的不同是美国中南地区 有8条带，而敏感品系的只有3条带，而E一1，E一3和E-10只在抗性品系中出现；抗性棉蚜酯酶的E- 11，E-12比敏感的电泳速率快，很可能是酶分子的构型发生了变化，这种构型上的改变可能与棉蚜的 敌敌畏抗性有关。另外E一1，E一3和E一10很可能是导致棉蚜对敌敌畏产生抗性的原因，但不能肯定它 们的作用是直接的还是间接的。这也印证了O’Brien等的结果。 5．3，5．4 个等电点组分，活性较高的为pI5．5，5．8和6．0；E一2中有6个等电点组分，活性较高的为pI 和6．0，而E一3带型与前两者不同，只有pI5．27，5．35，7．5三个完全不同的组分；酯酶活性较高的品 系都属于E-1型，活性较低的都属于E一2型；且证明了酶的带型与酶的活性高低存在一定内在联系。 5．83，5．57这2个组分在敏感品系中不存在，鉴定出是52kDa的蛋 抗性棉蚜的CarE分析，发现pI 白。Saito(2000)等用相同方法测定发现，有机磷抗性棉蚜晶系等电点组分与敏感品系有所不同，仅 中国棉花学会2008年年会论文汇编立7是 5．5，5．8组分差异极可能是抗药性产生的原因。 抗性棉蚜存在5．5和5．8等电点组分。由此推测，pI 李飞等对泰安、莱阳、南京、北京和安阳抗性棉蚜的研究还发现安阳品系羧酸酯酶Km值达 变化，影响了酶对模式底物a一乙酸萘酯的水解能力，但其对杀虫剂的水解能力却有所提高。而孙鲁 娟等对抗氧化乐果和敏感棉蚜羧酸酯酶活性的试验得到了不尽相同的结果：棉蚜敏感品系羧酸酯酶 对a一乙酸萘酯和a一丁酸萘酯的活性明显高于抗性品系，而对a一磷酸萘酯和p一磷酸萘酯的活性两个品 系间没有显著差异；Km和Vmax没有明显差异；酯酶同下酶电泳也表明，敏感品系5条同工酶带对 a一乙酸萘酯的水解活性显著高