响应面法优化碱性蛋白酶提取野生山核桃籽粕蛋白.pdfVIP

第 39卷第 3期 粮食舯技 锯；i} Vo1．39．No．3 2014年 6月 Grain5cienceand ITechnolo~yand~Economy Jun．2O14 响应面法优化碱性蛋白酶提取野生山核桃籽粕蛋白 冯 妙 ，王 珏，揭雅娇 ，董 曙，黄 群 (吉首大学 食品科学研究所，湖南 吉首 416000) [摘要]为研究响应面法优化碱性蛋白酶提取野生山核桃籽粕蛋白质的工艺，在单因素试验的基础上考察了 加酶量、pH值、提取温度和提取时间等条件对蛋 白质提取率的影响。采用Box～BehnkenDesign试验设计，进 行四因素三水平的中心组合试验，建立了蛋白质提取率与各主效因子的二次回归模型方程。结果表明，最佳 提取条件为加酶量4．O％、plil2．0、温度47℃、提取时间2．0h。在此条件下，蛋 白质提取率可达81．90％。 [关键词]野生山核桃 ；蛋白质；碱性蛋白酶；提取率；响应面法 山核桃是一种寿命长、单株挂果率高的珍贵树 2AB型鼓风恒温干燥箱、高速万能粉碎机：天津市泰 种ⅢJ]，盛产于湖南 、广西、四JIf的交界地——湘西怀 斯特仪器有限公司；电子天平、722型分光光度计： 化靖州。山核桃脂肪含量丰富，山核桃油呈金黄色， 上海舜宇恒平科学仪器有限公司；HH—s2型恒温水 是防癌抗癌、抗衰老、提高记忆力的高级保健植物油。 浴锅：金坛市成辉仪器厂；PH一2型酸度计 ：上海精科 核桃油具有润肤、阴足肺气的功能，中医称 山核桃为 仪器有限公司；KDN一04C型凯氏定氮仪：浙江托普 长寿果 ，而湖南产山核桃果仁出油率在 5个品种中 仪器有限公司。 最高 ]。不饱和脂肪酸含量是判别食用油品质的重 1．1．2 原料与试剂 要因素，彭湘莲等 测定湖南山核桃油中质量分数 野生山核桃籽粕：安江市绿色食品有限公司；碱 92．16％是不饱和脂肪酸，单不饱和脂肪酸油酸又 占 性蛋白酶(BR)：上海如吉生物科技发展有限公司； 其大宗，高达68．03％。野生山核桃蛋白营养价值可 考马斯亮蓝 G一250：Amreso公司；牛血清蛋 白(优级 以与动物蛋 白相媲美 ，富含多种氨基酸，其 中必需 纯)：Biosharp公司；硼酸 、95％乙醇 、NaOH、K2SO、无 氨基酸含量相对于其他植物蛋 白较高H]。野生山核 水NaCO，、CuSO、H2SO等均为分析纯。 桃仁蛋白颇具营养保健功能，有降低血液胆固醇、润 1．2 试验方法 肠、开脾健 胃等功效，在食疗界引起了广泛关注，极 1．2．1 样 品处理 具开发利用价值。目前对山核桃的研究还注重于油 将野生山核桃籽粕用万能粉碎机粉碎，置于恒 脂方面，野生山核桃油 、野生核桃仁 、山核桃营养 温干燥箱中4O℃干燥24h，过80目筛 。 粉，但山核桃蛋 白质方面的研究动态还比较少[。 1．2．2 野生山核桃籽粕蛋 白含量测定 核桃的深加工中，核桃仁籽粕被丢弃 ，没有得到充 采用微量凯氏定氮法(GB5009．5—2010)E8]，测得 分利用 ，十分可惜 ]。投入对野生山核桃蛋 白质的研 其蛋 白质含量为22．10％。 究无疑对充分利用资源，提高其经济利用价值方面 1．2．3 提取工艺流程 都有非常大的作用。为此，本试验立足于探索碱性蛋 野生山核桃籽粕一粉碎、过 80目筛一加水配成 白酶法对野生山核桃籽粕蛋 白质的提取 ，通过响应 l：12(g／mL)的固液比 加入碱性蛋白酶一沸水浴 15 面法优化提取工艺。 min灭酶一离心分离(4500r／min，30min)取上清液 1 材料与方法 一定容一稀释一测定蛋 白含量。