中国两系杂交水稻光温敏核不育基因的鉴定与演化分析.pdfVIP

中国农业科学 2015，48(1)：1-9 ScientiaAgriculturaSinica doi：10．3864~．issn．0578—1752．2015．01．001 中国两系杂交水稻光温敏核不育基因的鉴定与演化分析 张华丽 ，陈晓阳 ，黄建中 ，鄂志国 ，龚俊义 ，舒庆尧 (浙江大学原子核农业科学研究所／水稻生物学国家重点实验室，杭州 310029； 金华市农业科学研究院，浙江金华 321017 中国水稻研究所，杭州311401) 摘要：【目的】鉴定中国生产上应用的两系不育系所携带的光温敏核不育基因，揭示两系杂交稻光温敏核不 育基因的演变过程。【方法】收集光温敏核雄性不育水稻材料共90份，包括农垦58S、安农S-1和株 1s等衍生系。 采用改良CTAB法从水稻叶片中提取基因组DNA，根据光敏不育基因所含突变设计 1个功能性CAPS标记，用引物 NK-F(5-ATCCCACAAATCCTTTAGCA-3)和NK-R(5-CCGTTATAGATAGACCCGAGA-3)扩增包含该突变位点的片段，用内 切酶 RsaI酶切并检测，可清晰区分纯合光敏不育系 ( )(329bp)、纯合野生型 ( )材料 (4i4bp) 和杂合型 (1ncfl／]ncR )材料 (414和 329bpo温敏不育基因RNZ的分型则采用功能性dCAPS标记dCAPS—rnz， 待测材料分别用引物对RNZ1F(5r_ACCGCGCCGCCACCGGGTCGGCCGGAG一3)／RNZR(5-TGAAGAGGAACTCCTGCGAGACGG一3) 和 RNZ2F (5一AccGcGccGccAccGGGTcGGccc从G一3)／RNZR扩增，产物分别用内切酶 ttinfI和 I酶切，酶切产 物经电泳分离检测，纯合温敏不育系 ( )不能被上述 2种内切酶所酶切，纯合野生型 RNZ和 可分别被 ltinfI和 I完全酶切，而杂合型RNE／RNZ和 ／^ 可分别被 HinfI和 I不完全酶切 采用上述功能 性分子标记鉴定两系不育系所携带的光敏 (IncR)和温敏核不育基因 (RNf)，并结合不育系的系谱信息和中国 水稻数据库的年度推广面积数据分析 IncR和 RNZ在中国两系杂交稻生产中应用的历史与现状。【结果】以农垦 58s为唯一不育基因源的47个两系不育系中，12个携带 IncR，29个携带 ，2个同时携带 lncR和 RNE，4 个不携带这两个基因；衍生自安农 S-I和株 1s的18个不育系则均携带RNZ~；由农垦 58S衍生系 (如培矮 64S) 与安农 S-1复交育成的不育系也全部携带RNZ~；由培矮 64S与株 1s复交育成的2个不育系中1个携带肌 ，而 另 1个则同时携带 和RNE；另外 16个与农垦58s、安农 S-I及株 1s无血 关系的独立起源两系不育系中有 6个携带 lncR，9个携带RNZ等位基因，1个 (衡农S-I)则既不携带 lncR也不带RN2。综合这些不育系携带 光温敏基因的鉴定结果，结合不育系选育的系谱资料，绘制了包含 92个两系不育系所携带的光温敏基因图。另外， 根据这些两系不育系所配制组合的种植面积数据 (分品种)，发现 1993—2012年中国两系杂交稻中不育基因的利 用经历了从光敏到温敏的演化过程，携带RNE的不育系所配制组合及推广面积在生产中的应用迅速增加，2012年 温敏不育系配制的杂交稻 已占两系杂交稻种植面积的95％以上，形成了以携带肌 的不育系为主的局面。【结论】 系统明晰了中国两系水稻不育系携带的光温敏不育基因及其与品种系谱之间存在的不一致性，从光敏不育系杂交 后代中选育出了温敏不育水稻，且携带肌 的不育系已在目前两系杂交稻生产中占绝对主导地位。 关键词：杂交水稻；光敏核不育；温敏核不育；品种演化；分子标记 IdentificationandTransitionAnalysisofPhoto--／Thermo-·Sensitive GenicMaleSterileGenesinTw