产苯乳酸的乳酸菌分离筛选及菌种鉴定.pdfVIP

维普资讯 产苯乳酸的乳酸菌分离筛选及菌种鉴定 李兴峰 ，江 波 ，潘蓓蕾 ，沐万孟 ，张 涛 1(江南大学食品科学与安全教育部重点实验室 ，江苏无锡，214036) 2(中国食 品科学技术学会 ，北京，100833) 摘 要 通过对 自然发酵泡菜 中乳酸菌的分离，建立 了一种准确、快速 的苯乳酸产生菌的筛选方法。在 112株筛 选菌株 中，获得 1株苯乳酸高产菌株 SK007。研究了苯丙氨酸对苯乳酸合成的影响，即增加苯丙氨酸 的浓度可以 提高苯乳酸产量，苯丙氨酸是苯乳酸合成的前体 。高产菌株经 16SrDNA序列初步鉴定为 Lactobacillussp．，Gen— Bank接受号为DQ534529。系统发育分析表 明它与植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)亲缘关系最近。 关键词 苯乳酸，乳酸菌，菌株筛选，16SrDNA，苯丙氨酸 苯乳酸 (phenyllacficacid，PIA)，也称 3一苯基乳 此，从不 同来源分离筛选能够产生苯乳酸的乳酸菌非 酸或 B一苯乳酸，即2一羟基一3一苯基丙酸 ，是近年来发现 常重要 。 的一种新型天然防腐剂。1998年，Dieuleveux|1发现 文 中从 自然发酵的泡菜中分离 、筛选产苯乳酸的 白地霉 (Geotrichum candidum)发酵的干酪对单核 乳酸菌 ，研究苯乳酸的生物合成并且利用 16SrDNA 细胞增生李斯特菌 (Listeriamonocytogenes)有很强 序列对高产菌株进行初步鉴定。 的抑制作用，通过分离、鉴定 ，最终确定苯乳酸是其 中 l 材料与方法 的主要抑菌物质 。2003年 ，Lavermicocco_2]研究了苯 乳酸对多种引起食品腐败的真菌的作用 ，发现其有宽 1．1 试验材料 广的抑菌谱 ，如抑制黑曲霉 (Aspergillusniger)、黄 1．1．1 样品采集 曲霉 (Aspergillusflavus)、娄地青霉 (Penicillium 泡菜样品购 自无锡天润发超市。 roqueforti)等 。与 Nisin($L链球菌素)相 比，苯乳酸 1．1．2 培养基 抑菌谱宽，能抑制多种食源性致病菌、腐败菌 ，特别是 MRS培养基 (g／L)：葡萄糖 2O，酵母膏 5，蛋 白 能抑制真菌污染 ；溶解性好 ，易于在食品体系中扩散 ； 胨 1O，牛肉膏 1O，K HPO 2，乙酸钠 5，柠檬酸二铵 稳定性高，具有宽广 的pH范 围和热稳定性 ，这些优 2，MgSO4 ·7H2O 0．58，MnSO4 ·4H2O 0．25，吐温 点决定了它在食品工业具有广阔的应用前景_3]。 8O1mL。调 PH 至 6．2～6．4。 苯乳酸可由多种微生物产生，如 白地霉口]、丙酸 保藏培养基 (g／L)：葡萄糖 15，酵母膏 1O，Ca— 菌[63和乳酸菌_5]。由于乳酸菌具有 GRAS(公认为安 Co315，琼脂 15，pH6．2～6．4。 全)资格 ，可广泛用于发酵食 品的生产。2000年 ，La— 分离培基 (g／L)：MRS培养基 中添加质量分数 vermicocca[从 酸 面 团 中分离 到 的植 物乳 杆 菌 为 3 的CaCO。、2 的琼脂。 (Lactobacillusplantarum )21B能产生苯乳酸，这 筛选培养基 (g／L)：同MRS培养基 。 是关于乳酸菌产生苯乳酸的首次报道。随后 ，相继发