CB2受体激动剂对肝脏IR小鼠肝功能及肝组织MPO及MDA表达的影响.pdfVIP

山东医药 2014年第 54卷第 38期 CB2受体激动剂对肝脏 I／R小鼠肝功能 及肝组织 MPO及 MDA表达的影响 殷霞丽。李 勇，吴 瑶。姬 诺，李冰冰，金 陵 (南京大学医学院附属鼓楼医院，南京210008) 摘要：目的 探讨大麻素受体2(CB2)激动剂对肝脏缺血再灌注 (VR)小鼠的肝保护作用。方法 48只雄性 C57BL／6J小鼠随机分为假手术组、模型组、激动剂组及联合组，每组 12只。后三组建立肝脏 UR模型。术中阻断 肝动脉和门静脉血流前60min，激动剂组腹腔注射CB2受体激动剂JWH13320mg／kg；联合组注射JWH1332Omg／ kg和 CB2受体拮抗剂 Sg／kg；假手术组及模型组注射等量生理盐水。再灌注45min时采集血标本检 测各组ALT及AST水平 ；检测肝脏组织匀浆中丙二醛(MDA)及髓过氧化物酶(MPO)水平。结果 血清AST、A 水平：模型组、激动剂组及联合组明显高于假手术组 ，激动剂组及联合组 明显低于模型组，激动剂组明显低于联合 组；P均0．05。MDA及MPO水平：模型组、激动剂组及联合组明显高于假手术组，激动剂组及联合组明显低于模 型组，激动剂组明显低于联合组 ；P均0．05。结论 选择性 CB2受体激动剂可减轻肝脏 UR引起的血清转氨酶 升高，减轻肝组织的炎症以及氧化应激反应，具有肝保护效应。 关键词：大麻素受体；缺血再灌注损伤；肝脏；氧化应激 doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2014．38．O11 中图分类号：R575 文献标志码：A 文章编号：1002-266X(2014)38_oO35 2 缺血再灌注(I／R)的破坏性影响是急性复氧后 模型组、激动剂组及联合组制作肝 I／R模型：术前 8 的活性氧和氮物质所致，可直接导致组织损伤并引 h禁食，自由饮水，腹膜腔注射氯胺酮和地西泮混合 发炎症、细胞死亡等一连串的反应，最终导致靶器官 液(1：1)0．025mL／10g麻醉。采用正中切 口剖腹 功能衰竭。大麻素 (CB)受体是指对大麻类物质有 暴露肝脏；微动脉瘤夹钳钳夹肝动脉和门静脉30 应答的受体，其分为两种亚型，即CB1和CB2；二者 min后去除微血管瘤夹钳，恢复血流 (再灌注)45 均为G蛋 白耦联受体。CB1受体包含 473个氨基 rain；期间肝脏用浸有0．9％保护液(含硫柳汞、硼酸 酸，主要存在于神经系统；CB2受体包含360个氨基 和EDTA)的纱布于37℃中保湿。假手术组进腹后 酸，主要存在于外周免疫系统。近年研究发现，CB2 仅分离肝十二指肠韧带，不阻断肝门血管。阻断肝 受体在炎症、疼痛，动脉粥样硬化和骨质疏松症的治 动脉和门静脉血流前60min，激动剂组腹腔注射 疗方面具有重要作用 ，但其在肝 I／R损伤中的作用 JWH13320ms／kg；联合组注射 JWH13320ms／kg 及机制鲜有报道。2013年4～9月，我们观察了 和Sg／kg；假手术组及模型组注射等量 CB2受体对肝脏 I／R损伤小鼠模型肝功能及肝组织 生理盐水 。 匀浆丙二醛 (MDA)及髓过氧化物酶(MPO)水平 的 1．2 相关指标观察 影响 ，现报告如下 。 1．2．1 肝功能指标 再灌注45min时取下腔静脉 1 材料与方法 血 1mL，离心分离血清 ；采用多功能生化分析仪测 1．1 材料 动物：健康雄性 C57BL／6J小鼠48只 定(ALT)、谷草转氨酶水平。 (南京大学医学院附属鼓楼医院实验动物中心提 1．2．2 肝组织匀浆中MDA及MPO水平 再灌注 供，体质量20～30g)。CB2受体激动剂 JWHI33 45min后取出肝脏称重，快速液氮冷冻，制作肝组 (购 自美国Tocfis公司)，CB2受体拮抗剂SR144528 织匀浆 (用组织捣碎机 10000～15000r／min快速