D101大孔树脂纯化雪荔组方总黄酮工艺.pdfVIP

2014年 l0月 中 成 药 October2014 第36卷 第 lO期 ChineseTraditionalPatentMedicine V01．36 No．10 DIO1大孔树脂纯化雪荔组方总黄酮工艺 孙启文 ， 吴 松 ， 方 芸 (1．南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院，江苏 南京210029；2．南京大学医学院附属鼓楼医院， 江苏 南京 210008) 摘要：目的 初步研究大孔树脂纯化雪荔组方总黄酮的工艺条件和参数。方法 以总黄酮比吸附量、比解吸量等为指 标，筛选出富集雪荔组方总黄酮最优树脂。并通过单因素考察该树脂纯化雪荔组方总黄酮 的最佳工艺。结果 用 D101树脂纯化雪荔组方总黄酮的最佳工艺为上样质量浓度 1 mL (折算成生药材)，树脂．提取液比例为 1：1，上样 体积流量 1BV／h，分别用4BV水除杂，40％乙醇洗脱，体积流量 1BV／h，洗脱液收集6BV。结论 该工艺稳定性 良 好 ，优选工艺得到的总黄酮量达到 (79．21±1．13)％。 关键词：大孔树脂；雪荔组方；总黄酮；纯化 中图分类号：R284．2 文献标志码：B 文章编号：1001—1528(2014)10．2208-04 doi：10．3969／j．issn．1001—1528．2014．10．048 雪荔组方是南京大学医学院附属鼓楼医院院内制剂 ， (上海精宏实验设备有限公司)。 由荔枝草、车前草、六月雪和紫花地丁四味药材组成 ，临 2 方法与结果 床用于治疗泌尿系统感染、。肾盂肾炎等…。该制剂经临 2．1 雪荔溶液的制备 按2：2：2：1的比例称取荔枝草、 床应用，验证 了其治疗尿路感染的综合疗效，毒副作用 车前草、六月雪、紫花地丁置圆底烧瓶中，加 10倍量蒸馏 低 ，且能克服抗感染药物容易产生耐药性的缺点 J。前 水 ，加热回流2h，过滤，滤渣再加8倍量蒸馏水继续煎煮 期研究表明，雪荔组方的乙酸乙酯部位有 明显的抑菌效 2h，过滤，合并滤液，抽滤后用旋转蒸发仪将滤液浓缩至 果 J，其主要成分为中等极性化合物。四味药材 中几乎 相当于原药材 1g／mL，加无水乙醇使溶液含醇量达 60％， 都含有黄酮 ，且黄酮类成分具有多种药理作用 J。本实 醇沉液置冰箱72h后抽滤，滤液挥干乙醇后浓缩至相当于 验对雪荔组方总黄酮大孔树脂纯化方法进行了初步研究 ， 原药材 1g／mL，备用。 为深入研究 中药复方中的活性成分和药效作用机理奠定 2．2 总黄酮标准曲线的建立 基础。 2．2．1 对照品溶液的制备 精密称取 120oC干燥至恒定质 1 仪器与试剂 量的芦丁对照品10．6mg，置 50mL量瓶 中，加甲醇适量 ， 1．1 试剂 芦丁对照品 (中国食品药品检定研究院，批号 超声处理使溶解 ，放冷 ，加甲醇至刻度 ，摇匀，即得。 100080．200707)；亚硝酸钠为分析纯 (上海久亿化学试剂 2．2．2 紫外吸收波长的测定 精密取对照品溶液3mL， 有限公司)；硝酸铝为分析纯 (上海振欣试剂厂)；氢氧化 雪荔溶液 1mL，置于25mL量瓶中，加水至6mL，加新鲜 钠为分析纯 (南京化学试剂有限公司)；甲醇为分析纯。 配置 5％ NaNO2溶液 1mL，摇匀 ，放置 6min，加 10％ 1．2 药材 荔枝草、车前草、六月雪和紫花地丁购于南京 Al(NO3)3溶液 1mL，摇匀，放置 6min，加 10％NaOH溶 市鼓楼医院，经南京中医药大学药学院陈建伟教授分别鉴 液 10mL，加50％甲醇至刻度，摇匀，放置 15min，以相 定为唇线科鼠尾草属植物荔枝草SalviaplebeiaR．Br．的干 应试剂为空白，立即照紫外一可见分光光度法 ( 《中国药 燥全草 ，车前科植物车前PlantagoasiaticaL．的干燥全草， 典》201