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犬狂犬病免疫抗体水平的检测和 狂犬病免疫方法探索 刘占斌戴宗浩徐玉生龚剑峰 (公安部南昌警犬基地) 摘要：本实验通过抗体酶联免疫吸附试验，对某犬场的犬进行了狂犬病疫苗免疫注射 和抗体水平的检测。结果表明，注射国产弱毒多联苗犬体内的狂犬病抗体水平要比注射进 u灭活苗的抗体水平高，公犬体内的抗体水平普遍比母犬要高，未注射过狂犬病疫苗的幼 犬体内的狂犬病抗体水平与阴性对照犬相近。四个月前注射国产多联弱毒苗人体内的抗 体水平比较低，母犬体内的抗体水平更低．这说明该犬场犬的狂犬病免疫水平需要进一步 加强．同产弱毒多联疫苗一年内需要至少两次注射。 关键词：犬，狂犬病抗体水平检测，狂人病免疫方法建议 狂犬病是一种重要的人犬共患传染病．在每年的全国法定报告传染病疫情通报中，虽 然狂犬病发病数在前五位之后，但因患狂犬病而死亡的人数却常居前五位，甚至位居榜首。 随着宠物业和警犬事业的发展，犬与人类的生活越来越紧密。根据狂犬病预防办法，如果 在日常生活和工作中被犬咬伤或抓伤，都应该进行狂犬病疫苗注射。如何作好犬狂犬病的 预防和人类自身的安全防范日益显得重要。冈为根据国内相关报道，14．9％的外观健康犬 都是狂犬病毒携带者。那么怎样才能知道我们的爱犬是否产生了足够的保护性抗体呢? 下面想以我们进行的狂犬病抗体水平普查的结果，介绍一下犬狂犬病的免疫预防和抗体水 平检测方法。 l、检测材料 恒温培养箱，酶标仪，犬狂犬病毒抗体酶联免疫测定试剂盒，离心机，犬IllL清。 2、待检测犬的选择和处理 在四个月前用犬七联冻干活疫苗免疫注射的健康犬群中，随机选取一头公犬和一头母 犬用犬七联冻干活疫苗进行免疫注射；随机选取5头母犬，用进口灭活狂犬病疫苗进行免疫 注射。一周后采血分离JlIL清。同时随机采取3头公犬和3头母犬的血液，随机采取2只45 日龄(未免疫过含狂犬病毒的疫苗)幼犬的血液并分离血清。 3、方法 3．1参照实验动物的抗体检测标准，将待检血清以1：160倍进行稀释后。加入到狂人病 毒抗原包被板(人狂犬病毒抗体检测包被板)中，恒温孵育30分钟，使待测血清中的抗体与 狂犬病毒抗原结合，然后洗涤，除去未结合的血清。 352 3．2加入酶标抗抗体(HRP一羊抗犬IgG抗体)，恒温孵育30分钟，使之与包被板中的 抗原抗体复合物上的犬IgC结合，洗涤，除去未结合的酶标抗抗体。 3．3加人底物，恒温孵育lO分钟，终止反应后，用酶标仪检测光密度值进行定量测定 (也可以用肉跟大致判定阳性与阴性)。 3．4同时设置2个阴性对照孔和1个阳性对照孔。阴性皿清采自未免疫过狂犬病毒的 实验动物比格犬的幼犬(幼犬也未免疫过狂犬病毒疫苗)。阳性血清采自多次免疫注射过 狂犬病毒的实验比格犬。 4、结果 (4-)，l，5≤P／N值2．1为可疑(4-)，P／N值1．5为阴性(一)。 组另II 编号 性别 OD值 判定结果 l周前国产狂犬病疫苗加强 AI 公 0．263 ++ 组 A2 母 0．205 ++ BI 母 0．198 + B2 母 O．129 ± 1周前注射进口灭活狂犬病 B3 母 O．104 ± 疫苗加强组 B4 母 0．106 ± B5 母 0．083 Cl 公 O．177 + C2 公 O．104 ±