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大肠杆菌严谨型RNA聚合酶的筛选及体内转录活性测定.pdf
卷 期
! # 微 生 物 学 报 !（）：
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年 月 日
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大肠杆菌严谨型!# 聚合酶的筛选及体内转录活性测定
刘常宏，沈悦斐，薛雅蓉，彭士明
（南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室 南京 #-$$/ ）
摘 要：利用选择性培养基筛选大肠杆菌自然突变菌株，经噬菌体 转导和蛋白质互补试验，发现一株突变体
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（ ）的突变基因发生在编码 聚合酶 亚基的 基因上，经 序列分析，发现突变位点发生在第
CDE$$- FG’ H !#$ IG’
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个碱基上，由 变成了 ，导致编码的氨基酸由甘氨酸（ ）变成半胱氨酸（ ）。体内转录试验表明该突变
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聚合酶转录严谨型启动子控制基因的活性显著降低，其 半乳糖苷酶的活性是野生型菌株的 ，而转录非
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严谨型启动子控制基因的活性显著提高，其 半乳糖苷酶的活性约是野生型菌株的 倍。研究结果对探讨 聚
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合酶结构与功能的关系以及FG’ 聚合酶在细菌严谨反应过程中的作用具有重要意义。
关键词：大肠杆菌；严谨反应； 聚合酶
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中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ）
L/ ’ $$$-40#$/ #$$ $#4$#$4$!
严谨反应（ ）是细菌适应环境的 可见，由氨基酸缺少诱导、 介导、 聚合酶
MN)*O3N )3M(PM3 ((J(( FG’
一种应激代谢方式，涉及广泛的生物转录调控程序。 实施的严谨反应在细菌的生命活动过程中扮演重要
应激环境包括许多种，如营养缺乏、高温、酸、氧化、 的角色，明确细菌严
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