十二章 四.pptVIP

1、定性鉴别方法： 对比法： （1）对比吸收光谱一致性 （2）对比吸收光谱特征数据 （3）对比吸光度比值或吸光系数比值 安宫黄体酮（M=386.53) 例如：维生素B12的鉴别： 1985版药典规定： 2、纯度检测 （一）杂质检查 三种情况 A、在某一波长区，化合物无明显吸收，而杂质有较强吸收 方法： 作此波长区内化合物的吸收光谱，与纯物质的吸收光谱比较 无吸收或弱吸收——无杂质 有较强吸收——有杂质 例：乙醇和环已烷 256nm 无吸 收 苯 256nm 有吸收 B、化合物在某波长区有强吸收，杂质无吸收或弱吸收： 方法： （1）测定化合物在此波长区的吸光系数，与纯物质的吸光系数比较 吸光系数值不变——无杂质 吸光系数值降低——有杂质 （2）作此波长区化合物的吸收光谱，与同浓度的纯物质的吸收光谱比较 C、化合物有较强吸收，而杂质在此波长区比化合物有更强吸收 方法： 测量化合物在此波长处吸收系数或吸收光谱，与纯物质比较 吸光系数增大 或吸收曲线变形 （二）杂质的限量检测 A、化合物无吸收，而杂质有吸收： 规定化合物在该波长的吸收值不能大于某一数值。 例：肾上腺素 310nm 无吸收 肾上腺酮 310nm 有吸收 规定：肾上腺酮含量0.06% 则肾上腺素（2mg/mlHCl溶液) B、在化合物 处杂质无吸收，而在化合物 处杂质有吸收 规定：化合物在 与 处吸光度比值为一限量 例：碘磷： 杂质 无吸收 有吸收 纯碘磷： 规定：碘磷药品 二 定量分析方法 二、单组分样品的定量方法 依据：Lambert-Beer定律 A=ECl 注意：(测定波长的选择原则) 1、为提高测量准确度和灵敏度，应选择峰顶较平的最大吸收波长进行测量 2、应选不易受干扰的吸收峰波长进行测定。 单组分定量方法： （一）吸光系数法 (1)配制一定浓度的样品溶液，测量某波长下的吸光度A值 （2）查文献得吸光系数 或 或同条件下测量出 或 （3）计算样品浓度： 再求含量。 例：B12的含量测定 针剂：标示量为250μg/ml,即0.250mg/ml 操作（1）取1.00ml样品配成10.00ml溶液 （2）取上述溶液盛于 1.00cm吸收池中，在361nm处测量A值为0.507。 已知B12在361nm处的 求：（1）测定液中B12 的浓度 （2）B12针剂样品中组分B12的含量 （3）求样品标示量的百分含量 解：（1）根据 已知：A=0.507 则： 吸光系数法要求： （1）A与C是一条过原点或近似过原点的直线关系 （2）要测量或能查到 或 (3)单色光 对仪器要求高 （二）标准曲线法 操作： 1、配制5~7个不同浓度的标准溶液，同一条件下测量吸光度值。 C1，C2，C3，C4，C5 A1，A2，A3，A4，A5 2、作A~C标准曲线（称工作曲线）或求回归方程。 3、相同条件下配制样品溶液，并测量吸光度A样 4、从工作曲线或回归方程中求C样 标准曲线法要求： 1、A与C是一条直线或近似一条直线关系 2、测量过程中，要求仪器的工作状态及测量条件保持一致。 3、样品浓度Cx应落在线性范围内 4、标准溶液与试样组成相似。 5、A=a+bC，a要比b小102以上 （三）对照法 操作 1、在相同条件下配制一个标准溶液和一个样品溶液（C标与C样） 2、在相同条件下测量A标和A样 3、计算： 对照法要求： 1、A与C是一条过原点或近似过原点的直线关系 2、C样与C标尽量接近 三、多组分样品的定量方法 依据：1、Lambert-Beer定律 2、吸光度的加和性 (一)普通分光光度法 (二) 、双波长分光光度法 安钠咖中咖啡因与苯甲酸钠的含量测定 苯甲酸钠： 等吸收波长253nm~272nm 咖啡因： 等吸收波长230nm~257nm 例：测定苯甲酸钠：则咖啡因是干扰 组分 测量波长 参比波长 同理： 测定咖啡因：则苯甲酸钠是干扰组分 测量波长 参比波长 2、系数倍率法 原理：假设某一干扰组分在选定两个 波长λ1和λ2处测得吸光度的 比值为K，即 例：混合样品：由x ，y组分组成 现被测组分是