C-G-Ha-HS支架改性协同原儿茶酸对NSPCs粘附及定向分化的影响.pdfVIP

第 28卷第5期 高 校 化 学 工 程 学 报 No．5 Vo1．28 2014 年 10月 JournalofChemicalEngineeringofChineseUniversities Oct． 2014 文章编号：1003—9015(2014)05—1051-08 网络出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／doYl0．3969~．issn．1003—9015．2014．05．14．05．html C．G．Ha．HS支架改性协同原儿茶酸对NS／PCs粘附及定向分化的影响 张晓庆，关 水，葛 丹，王树萍，刘天庆，马学虎 (大连理工大学 干细胞组织工程实验室，辽宁 大连 116024) 摘 要：通过层粘连蛋I~t(LN)对壳聚糖一明胶．透明质酸．硫酸肝素(C．G．Ha—HS)复合支架进行修饰，提高支架粘附率，优 化神经干 ／祖细胞(NSP／Cs)~维培养体系，同时考察了原儿茶酸(PCA)对三维条件下NS／PCs分化为多巴胺 (DA)能神经元 的影响。扫描电镜观察及 CCK．8分析表明，c．G—Ha—HS复合支架孔径为 90~130LLm，孔隙内的NSP／Cs伸出类似神经 样的突触使支架与细胞相互连接形成网状结构：培养4h后，LN修饰的c—G．Ha．HS(5：5)支架细胞粘附率增加至未修饰 组的(113．534-4．32)％；培养 96h后，细胞活率增加至未修饰组的(120．30±6．65)％：免疫细胞化学鉴定表明，1％胎牛 血清(FBS)和 O．06mmo1．L PCA协同作用，明显提高了NSP／Cs向DA能神经元分化率，TH阳性细胞分化率达~Jl(16．53 -40．65)％，增加至空支架组的(172．72-46．79)％：Nurr1阳性细胞分化率达~Jl(15．93．4-0．91)％，增加至空支架组的(181．23 -41．04)％；研究结果为PCA应用于NSP／Cs移植治疗PD提供了实验依据。 关键词：壳聚糖一明胶．透明质酸．硫酸肝素支架；层粘连蛋白；神经干 ／祖细胞；原儿茶酸；分化 中图分类号：Q813．1 文献标识码：A DOI：10．3969／j．issn．1003—9015．2014．05．14．05 TheSynergisticEffectofM odifiedChitosan--Gelatin--Hyaluronate-·HeparanSulfate SeaffoldsandPCA onNS／PCsAdhesionandDifferentiation ZHANGXiao—qing， GUAN Shui， GEdan， WANG Shu—ping， LIU Tian-qing， MA Xue—hu (StemCellandTissueEngineeringLaboratory,DalianUniversityofTechnology,Dalian116024，China) Abstract： Chitosan—gelatin—hyaluronate．heparansulfate(C．G—Ha．HS1scaffoldswerefabricatedandmodified with laminin (U in orderto improve scaffoldadhesion and optimize 3一D culture system ofneural stem／progenitorcellsfNS／PCs)．Theeffectsofprotocatechuicacid (PCA)ontheinducingofNS／PCs differentiationintodopaminergicneuronweredeterminedat3．D leve1．SEM andCCK．8assayresultsshow that theporesizeoftheC．．G—-Ha．．HSscaffoldsis90~130gm andtheNS／PCsareconnectedwithhtescaffoldsto form re