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第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集
14个鸡品种和红色原鸡TLR4基因外显子2多态性分析
刘艳,包文斌’常国斌,陈国宏
扬州大学动物科学与技术学院,扬州225009
关键词:鸡;TLR4基因:多态性
引言
Toll.1ike受体(Toll.1ike
先天性固有免疫中起着重要作用,在人类和多种动物病原菌的PAMP(病原相关分子模式)识别中起着关键
作用。在TLRs庞大家族中,人们兴趣尤为集中在TLR4研究上,它是细菌脂多糖LPS识别的主要受体,并
识别许多革兰氏阴性病原菌、衣原体、螺旋体和病毒等病原微生物,其受体基因的遗传差异可造成机体对多
种病原体抵抗力不一。国内关于畜禽TLR4基因对疾病的抗性/易感性相关的报道还很少,相关的研究才刚刚
起步,本试验对14个鸡品种和红色原鸡TLR4基因多态性进行分析,为今后深入研究TLR4基因及其对疾病
的抗性/易感性奠定基础。
材料方法
PCR
0L
rain S,72℃50
扩增反应体系,PCR程序为:95℃51个循环;94℃50s,60C退火30 S共35个循环;72℃
10min
1个循环;10℃保温。
结果
PCR.SSCP分析结果发现在此对引物中存在多态性。引物扩增的片段有3种基因型,分别定义为AA、
中的基因序列一致,定义为野生型;AA型与BB型相比在第114处和第142处各有一个G.+A的单碱基突变,
因此,AA型定义为突变型。将突变型的核苷酸序列演绎成氨基酸序列后,发现突变后第114处的氨基酸仍然为
异亮氨酸,因此该突变是一个沉默突变,第142处的氨基酸由谷氨酸转变成为赖氨酸,因此该突变是一个有义突
变。藏鸡和红色原鸡群体中只检测出BB基因型,而其他群体中均存在3种基因型,其中乌骨鸡AA基因型频
率最高,为0.6341;文昌鸡最低,为0.0429。
讨论
相关;藏鸡和红色原鸡群体中只具有BB基因型,已有很多报道表明红色原鸡和藏鸡处于野生或者半野生状态,
具有很强的抗病力,提示我们BB基因型可能是机体的免疫应答能力的有利基因型,同时鸡TLR4基因第2外
显子中G142A突变对疾病的抗性/易感性也值得进一步研究和分析。
致谢
资助。
一40—
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