藏绵羊OLA-DQA2基因第2外显子多态性PCR-SSCP分析.pdfVIP

第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集 藏绵羊OLA．DQA2基因第2外显子多态性的PCR．SSCP分析 刘秀u，胡江1j，罗玉柱1，2，3 物科学技术学院，兰州730070 关键词：OLA．DQA2基因；遗传多态性；PCR—SSCP；腐蹄病；藏绵羊 引言 绵羊腐蹄病是由节瘤拟杆菌引起高度接触性传染病，其特征是局部组织发炎、坏死，羊患病后生长不良、 掉膘、羊毛质量受损，病情严重且得不到及时治疗时会引起羊只死亡。藏绵羊于每年7-9月份的多雨季节易患 腐蹄病，如在甘肃和青海境内的藏绵羊发病率高达30％以上，死亡率最高可达10％，严重影响养羊业发展。 位于MHCII区的OLA．DQA2基因与腐蹄病抗性相关。本研究对藏绵羊该基因的遗传多态性进行分析，结合表 型观测资料，初步确定易感等位基因和抗性较强等位基因。 材料方法 藏绵羊选自甘肃省甘南藏族自治州大水种畜场104只，甘南州碌曲县牧民羊群595只(患腐蹄病223只)， 青海省海晏县哈里乡哈里村牧民羊群72只(患腐蹄病22只)，青海省河南县牧民羊群196只，颈静脉采血 10ml，ACD抗凝，．20℃冻存。用酚一氯仿抽提法从冻存血样中提取基因组DNA。采用PCR—SSCP方法检 测了967只表型正常和患病藏绵羊OLA．DQA2基因第2外显子的多态性，并克隆、测序群体内变异产生的各 等位基因序列。 结果 在本研究中共有16个不同的序列被确定，其中8个序列是公布的OLA．DQA2基因第2外显子的已有序 列；8个序列是首次发现的新序列，它们和已有绵羊DQA2基因序列具有很高的同源性。在序列分析中共有 FJl79551．FJl79558。 讨论与结论 等位基因之间，存在大量的多态位点，占其序列总长度的29．34％，表明该基因为多碱基突变，具有高度的多 态性。高度的序列多态性和大量突变位点的检测充分证明0／_．4．OQA2基因第2外显子具有丰富的遗传多态性， 群体中可能蕴藏着更多的抗性遗传资源。进一步更大范围的羊只表型观察与基因多态性分析，将可能提出31 种等位基因各自的腐蹄病抗性分险评估值，为开展抗病育种提供完善方案。 致谢 验室建设计划(085RTSA004)资助。感谢成述儒、王继卿、李少斌、张保云、闰伟等在样品采集过程中的 帮助。 通讯作者：罗玉柱，Email：luoyz@gsau．edu．cn 一88—