IRM-2等三种小鼠免疫学指标的测定和分析.pdfVIP

IRM．2等三种小鼠免疫学指标的测定与分析 玉月英，路璐，吴红英，李德冠，王勇，张俊伶，盂爱民 中阚医学科学院放射医学研究所，关津市分子核医学堂点实验室 系小鼠的生物学数据。方法：采翔盘滚学鬻规法分别对三种小鼠的终周盘自缨艟总数及分类、篱髓鸯核绸胞数及小鼠 腹腔臣噬细胞褥噬鸡红细胞进行测定。结果：IRM-2小鼠囱细胞总数、骨髓有核细胞数及巨憔细胞吞噬率均高干其父 母系，l、鼠，鸯显萋悭差舞pO。01)，3耱小鼠的翅缨鲶分类计数基本一致，无显警性差异．缝论；IRM．2小聚免疫及 造血功能较强，可作为新的小鼠近交系_|盘用于医紫生物学研究。 关键谲s，J、鼠；盘液学撰糕i鹭髓考核纲憝；重噬缨缝； 免疫箍寓 动物的盘液学性状是最常耀、最具锰床意义鲍检溅项露，落是实验动物选择应用的依据之一， 疆前圜滤唯一戆具有辐射挠性强鹃迓交系小Nt卜烈，为对其本身懿研究提供更遴一步的篱景资瓣，本 小鬣的应用研究提供依据。 材料与方法 1．小鼠：IRM．2小鼠为本所繁育，615小鼠爨奄叁中圈医学科学院出液病碘究所、ICR小鼠由本 所动物房提供。三种小鼠均为6周龄雄性，实验分3组，每组6只。 2．试裁； RPMll640，10％黔牛血溥(FBS)，青、链霉素，毛。谷胺酝氮，自细胞计数稀释液。 3．白细胞计数及分类：眼球取20121血加入0．38ml自细胞计数稀释液，破坏红细胞后，滴入计数 盘中，在显微镜下计数一定范基内懿自细胞数。巍缨憝分类：采用传统憋显微镜分类法，取血、推 片、自然晾干，经瑞氏染色，蒸馏水漂洗晾干后，于显微镜(油镜)下计100个白细胞，按自细胞 形态学特征逐个分别计数，计算中性粒缨熬、单核细胞、漆巴细怒所占的髫分眈。 4．骨髓有核细胞计数：取小鼠l侧股骨，冲洗骨髓腚，收集骨髓细胞制成怒液，用台盼蓝鉴定 缀脆活性在95％以上，计鼗嚣髓有核细胞数。 5．无菌条件下取各小鼠脑、脾脏、胸腺称重，计算脾和胸腺脏器指数。 6。小鼠黢腔巨噬缀魏吞噬功麓的测定：无菌收集小鼠腹腔重瀣缀施，取PBS注入小鼠腹腔收集 Ep管内，谲整缨胞浓度为lxl06／ml。将巨噬细胞放置籀孔扳内，再龆入璃红细胞，吞噬能，娥姆萨 染色20min，油镜下观察计数。吞噬率=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数／N计数的巨噬细胞总数×100％， 吞噬指数=(200个蠢噬细胞吞噬的鸡红细溉总数陀o。个臣噬细胞)÷2 7．脾淋巴细胞增殖试验：无菌操作取出小鼠脾脏细胞，采用FicoU分离液分离得到脾脏细胞。 h。然后取出培养板，按照celltiter-GloTM试剂盒操 为10ug／ml。37℃、5％C02、饱和湿度培养48 作说明操作，使用GloMa】【掰发光检测仅检i|《l细胞活力。 280 以未加药物组细胞为对照组，细胞增值率(％)=加药细胞RIII／对照组RLU×100％。 8．数据统计结果用x4-SD表示，两组比较用t检验。 结果 1．IRM．2、615、ICR小鼠白细胞计数及分类 结果见表1。从结果可以看出，IRM-2小鼠白细胞总数明显高于其他三品系小鼠，与父母系小鼠 组别 数量(只) WBC(×109／L)中性粒细胞(％) 单核细胞r％) 淋巴细胞(％) IRM一2 6 13．O±O．87 12．9+4．1 3．92±1．9579．6±4．3 ICR 6 6．8±0．72* 9．1±3．34 2．20±1．4786．0±4．3 615 6 4．4-L-_0．87*▲11．3±3．5 3．83±1．2182．8±4．2 注(1)与IRM-2比较，岬O．001 (2)ICR与615比较，▲P0．01 2．承M．2、615、ICR小鼠免疫器官指数及BMNC 01)，脾重指数高于615小鼠，但无显著性差异。 组别 体重 脑重 BMNC(x106)／股胸腺指数 脾重指数 吞噬指数 (g) (rag) 骨 (mg／g) (mg／g) IRM一2 25．61±453．0±10．9 2