过表达Pygo2促进脑胶质瘤C6细胞增殖.pdfVIP

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·155· 25例,复发性肿瘤38例,侵及双额部呈“蝴蝶形”者36例,侵及丘脑、下丘脑者19例。伴癫痫发作 32例,有精神症状19例,伴梗阻性脑积水者14例。术前均行MRI平扫加增强检查,病变侵及胼胝体膝 部30例,胼胝体前三分之一33例,一侧额瓣或额顶瓣开颅,显微镜下切除额部肿瘤达额叶深部内侧,沿 侧脑室额角前和大脑前动脉后切除胼胝体肿瘤,侵及侧脑室壁前角部分一并切除。其中14例另经纵 裂入路切除胼胝体部分肿瘤。双侧开颅12例。紧贴胼胝体处残瘤瘤腔内安放内放疗囊,皮下穿刺囊 置于额顶帽状腱膜下。室问孔受挤压者侧脑室内另安放开放式化疗囊,皮下注射搴按前放后化或左放 右化的原则亦安于帽状腱膜下,以利术后辨认注射,术后予常规化疗外并按计算量定期行131I囊内放 疗。结果胼胝体区肿瘤手术大部分切除38例,部分切除18例,仅行活检7例。病理结果:毛细胞性 星形细胞瘤10例,纤维性星形细胞瘤12例,间变性星形细胞瘤12例,胶质母细胞瘤11例,少突胶质细 胞瘤7例,混合性星形细胞瘤1l例。恢复良好44例,左侧肿瘤术后有短暂性失语和反应迟纯症状 7例,癫痫发作6例,上肢短暂性无力3例,1例死于下丘脑严重并发症。随访6—48个月,平均生存期 72周。结论胶质瘤侵及胼胝体易向对侧发展,堵塞室间孔,预后较差。设计手术入路时要兼顾额部人 路和经纵裂入路手术,侵及丘脑、下丘脑部分肿瘤手术切除困难。显微镜下次全切或切除部分肿瘤,术 后加用化疗和¨1I囊内放疗可延长患者生存期。 过表达Py902促进脑胶质瘤C6细胞的增殖 陈玉英 王海东 王占祥谭国伟 刘希尧 沈上杭 胶质瘤(glioma)是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,尽管手术、放射治疗及化学治疗等治疗手段现 在已取得不少的进步,但其临床治疗效果仍不令人满意。pygopus是近年新发现的Wnt信号通路中重 要功能蛋白…。Py902作为其主要的效应基因【2’与Wnt信号及多种恶性肿瘤发生密切相关旧j,目前关 于其在脑胶质瘤中作用的研究尚未见报道。我们前期研究发现Py902在脑胶质瘤组织中有高表达,并 随肿瘤恶性程度增加而表达增高,说明其在脑胶质瘤进展中起重要作用。故我们构建了重组体,并在 C6细胞中过表达Py902,探讨其在脑胶质瘤增殖中的作用及其分子机制。 材料和方法 1.材料:(1)细胞株、质粒及菌株:胶质瘤细胞系C6购于上海细胞研究所,Escherichiacoli感受态 I、Hind (2)主要试剂和仪器:限制性核酸内切酶EcoR 取试剂盒、胶回收试剂盒购自德国Qiagen公司,LB培养基、TRizolreagent、脂质体转染试剂 Cruz公司,Anti—flag多 I、DAPI购自美国 克隆抗体购自美国Upstate公司,增强化学发光试剂盒ECL购自美国Pierce公司,P 反转录试剂盒购自美国Gibco公司,实验所用试剂均为进口或国产分析纯试剂。PCR仪为美国Bio— Rad公司产品,流式细胞仪FACScan为美国BD公司产品。 作者单位:361003厦门大学附属第一医院;厦门市神经系统疾病诊治中心;重庆邮电大学生物信息学院生物技术教学部 ·156- 的Py902上游引物5 CCGGAATICCATCGCACAGTCACCCATCG一3’,分别含有Hindm和EcoRl酶切位点,设计克隆大鼠 10mM 10×PCR缓冲液,l斗ldNrlT混合物, Py902基因的编码序列。PCR反应体系为50山,其中,5lxl 4斗l 选挑取菌落后抽提质粒。构建的载体酶切鉴定正确后,进行DNA序列测序。(2)胶质瘤c6细胞转染: 2000试

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