狐狸TYR基因序列测定和分子系统进化分析.pdfVIP

第四届京津冀一体化畜牧兽医科技创新研讨会 畜牧学部分·遗传育种 暨“瑞普杯”新思想、新方法、新观点论坛 l论文集 狐狸TYR基因序列测定及分子系统进化分析 吴建华，刘铮铸，巩元芳“，冯敏山，刘谢荣，段玲欣，朱文进 (河北科技师范学院动物科技学院，河北秦皇岛066004) 摘要：为了探明狐狸TYR基因的序列结构及其对毛色的分化调控机制，本研究用PCR产物直接测 比对得到217bp狐狸TYR基因的外显子2序列，并对该序列进行了初步分析，得知其GC含量为 51．15％，，通过外显子2序列与其它物种的同源性分析，发现狐狸与家犬相似性最高．达98．62％，其 基因外显子2的保守性很强，狐狸与家犬的亲缘关系最近，无根系统进化树也得到了相似的结果 以上研究结果为狐狸毛色发育调控的机理以及毛色改良等的研究提供了很好的生物学基础信息 关键词：狐狸；TYR基因；外显子2；分子系统进化 酪氨酸酶(TYR)是动物黑色素细胞中黑色素合成的限速 银黑狐是赤狐的一个突变种，起源于北美洲的阿拉斯血： 酶。它是一个含铜的氧化还原酶，催化酪氨酸氧化成多巴，进 和西伯利亚东部地区，经过一百多年的人工饲养训化．已经成 一步将多巴氧化成多巴醌，多巴醌经过一系列的生化反应最 为人们养殖珍贵毛皮动物的主要品种。银黑狐被毛黑白棚 终合成黑色素…。酪氨酸酶由白化位点的酪氨酸酶基因编 间，有一层雾状的针毛，是现代人冬季裘皮服装的主要饰品 码，酪氨酸酶基因若发生功能性突变，可导致动物毛色出现白 银黑狐与蓝狐杂交生成的银蓝狐、蓝银狐；与赤狐杂交生成的 化现象，此现象已经在人‘“、牛‘31和猕猴‘451等动物上得到了 水晶狐、金岛狐、玛瑙狐等，集中了银黑狐、蓝狐、赤狐的优点， J。 证明。目前已报道有狼、家猫、虎等动物出现了白化个体M 针毛细而挺，短而平整，银色毛均匀分布，色彩华丽．是市场卜 由此可见，酪氨酸酶可能对动物毛色的形成有重要影响。另 主要的高档毛皮之一。但迄今为止，有关狐狸TYR基嘲的删 外，杨舒黎等…报道了TYR基因的多态性与绵羊毛色表型有 究仍相当薄弱。 极显著相关性(pO．01)，等位基因A可能参与控制毛色的鉴于以上研究背景，本研究采用PcR产物直接测序的方 黑色表型，等位基因B可能参与控制毛色的白色表型。陈志 法来获得狐狸TYR基因的序列，并对其序列作进一步的分 强冲1等对鸡TYR基因的多态性进行了研究，结果发现3个突析．为下一步基因表达、相应蛋白结构及毛色分化调控机制等 变位点与鸡的黑色素沉积表型表现出程度不同的相关性。张 的研究提供基础信息。 建勤”1等对不同鸡品种7rYR基因遗传变异分析结果表明，中1材料与方法 国地方鸡品种的7rYR基因蕴藏丰富变异资源，TYR基因5’ 1．1实验动物 侧翼区第l外显子区域与鸡的色素性状有着密切关联。目前 试验所用银黑狐的脾脏采自于秦皇岛市昌黎县“金岛特 鸡的7rYR基因的cDNA序列和部分第1内含子及5’调控区 种动物育种场”。 序列均已测得。哺乳动物毛色表型的实现与动物体内黑色素 1．2基因组DNA的提取 的种类、数量、合成及分布情况有关””…。 基因组DNA的提取采用传统的酚一氯仿抽提法““．TE 溶解，一20℃冻存。 十基金项目：国末自然科学基金；河北省自然科学基金 1．3引物设计和PCR扩增 (C2013407101)；河北省高等学校创新团队领军人才培育计划 (IJR0004)，河北省人才工程培养经费资助项目(25)。 作者简介：吴建华(1961一)，男(汉)，教授，硕士生导师．研究方向