Arthrobacter+nitroquajacolicus+HW08降解SW酶特性研究.pdfVIP

动物毒物学2013年 第28卷 第卜2期 HW08降解SW酶 么棚I加易口讹r刀伽g以咖cD眈以s 的特性研究 王妍李艳红康丹菊李金城王建华 (动物医学院，陕西杨凌，712100) 摘要：采用微生物酶制剂降解疯草中 可以将其视为一种潜在的牧草资源。 的毒性成分一苦马豆素(Sw)是一种 当前，生物降解有毒有害化合物的方 可开发利用的去除毒素的方法。本实 法被认为是一种比较经济、有效的措 验室从埋置疯草的黄花棘豆中筛选到 施[5。]。生物降解酶因具有高效、无刺 1株能降解Sw的菌株彳砌m6口c研激等特点，成为可开发利用的去除毒 Hw08。进一步研究 素的方法。为将疯草变为可食用的牧 ，2f加g“口，口cD，fc“s 发现H、瑚8菌的胞内酶能够降解Sw。 草资源，可采用生物降解方法进行处 鉴于此，本文对SW降解酶的特性进 理。这一过程主要可通过微生物的分 行了研究。结果发现Sw降解酶最适 解作用，利用微生物的酶系活动分解 降解温度30℃，保温80IIlin相对酶活 sw来实现【8，9】。如将生物降解技术运 min 力大于90％，但超过60℃保温10 用到Sw降解的过程中，不但使动物疯 即可失活；pH在7．0～10．0时，酶的草中毒的问题得到解决，而且将对畜 活力较稳定，pH为8．O时，相对酶活 牧生产的提高，生态环境的平衡起到 力最高；选用的15种金属离子中，只 重要作用。 有Coz+对该酶具有激活能力；化学试 本课题组从埋置疯草的土壤中已 分离出SW降解菌株，经鉴定为 剂PMSF、B．巯基乙醇、EDTA可作为 SW降解酶的抑制剂，TritonX一100和 HW08， 彳m，D6口c把，_，zf加q“口胁cD，fc“s BSA对可做为激活剂：应用TLC方法 并对该菌的胞内、外酶进行了分离检 检测氨基酸成分发现SW降解酶中可 测，发现胞内酶能够降解SW。本文在 此基础上对能够降解SW的胞内酶进 能含有Ser、Hyp、珊、m、Lys、 His、Om；经SDS—PAGE检测，SW诱行酶学性质研究，为SW降解酶的进一 导前后存在一条明显的特异性条带， 步纯化奠定基础。 分子量约为61kD；SW降解酶具有降 1材料与方法 解底物多样性的特点，除能够降解Sw 外，还具有降解邻苯二酚、邻苯二甲 1．1材料 酸、邻苯二胺的能力。通过上述对SW 1．1．1菌的来源 降解酶的特性研究为进一步分离纯化 提供了参考依据。 彳，旃，．D6口c而已r ，l打阳g”q7口cD矗0。岱 HW08为本实验室从埋置黄花棘豆的 苦马豆素(Swainsonine，SW)是 一种生物碱类植物毒素，主要存在于 土壤中分离、鉴定，能够以SW为惟 一碳源和能量进行生长[8】。 疯草中。这类植物在我国西北部地区 草场分布广泛，动物大量采食后可引 1．1．2主要试剂 起以神经中毒症状为特征的慢性中毒 SW经本试验室提取获得(纯 性疾病，严重者