内毒素脑损伤过程中脑红蛋白的表达和意义的相关研究.pdfVIP

壁报交流 中华医学会第4 次全国重症医学大会论文汇编 在 ICU 全科医护人员的共同努力下，患者病情逐渐平稳，成功渡过难关顺利转入普通病房， 随诊患者于一个月后出院。 讨论 血乳酸为反应全身灌注情况的一项指标，各种原因导致的组织缺氧均可以使乳酸生成 增加。在常规血流动力学监测指标改变之前，组织低灌注与缺氧已经存在，乳酸水平已经升 高。研究表明血乳酸持续升高与 APACHE II 评分密切相关。据统计，血乳酸水平持续高于 4mmol/l，病死率高达 80%。该病例组织低灌注时间长，衰竭脏器多，实为罕见的抢救成功 病例。 PO-148 内毒素脑损伤过程中脑红蛋白的表达及意义的相关研究 重庆医科大学附属第一医院麻醉科（400016）刘超 闵苏 摘要 目的 本课题通过复制内毒素休克大鼠模型和内毒素脑室注射脑损伤大鼠模型探讨内 毒素所致脑损伤过程中大鼠脑红蛋白（neuroglobin ，Ngb）的表达变化及其意义，以期为 内毒素性脑损伤修复机制的研究和临床干预性治疗提供实验依据。实验Ⅰ：脑红蛋白在内毒 素休克大鼠模型中的表达变化。方法 1：选用SD 大鼠70 只，随机分为 7 个组(n=10)：1 个 对照组，经尾静脉注入 0.5 mL 生理盐水；6 个内毒素干预组，采用经大鼠尾静脉注射 0.5 mL 革兰氏阴性菌胞壁脂多糖（0.016 g/kg 体质量）。对照组于注射生理盐水后 6h、内毒素干 预各组依分组分别于注射 LPS 后各时间段（3 h，6 h，12 h，24 h，48 h，72 h）收集血浆、 脑脊液，并处死大鼠留取海马和额叶皮质。应用酶联免疫吸附法、免疫印迹法和免疫组织化 学法检测标本中 Ngb 含量，应用干湿重法检测鼠脑含水量，应用投射电子显微镜检测大鼠额 叶皮质和海马组织神经元细胞器的肿胀程度。结果 1：①酶联免疫吸附法显示，注射内毒素 后额叶皮质、海马、脑脊液和血浆中 Ngb 含量显著高于对照组（P0.01），48 h 达峰值。 ②免疫印迹法显示实验各组均表达相对分子质量约为 17 kD 的Ngb 蛋白．内毒素干预各组 Ngb 蛋白表达量显著高于对照组，其中以 3 h 组表达量最低, 48 h 组和72 h 组表达量最高。 ③Ngb 免疫组化反应阳性物质主要位于锥体细胞的细胞质，呈黄褐色。④注射内毒素后，脑 组织含水量明显高于对照组（P0.01），48 h 含水量达峰值，为 0.8313。Ngb 表达量的上 调与脑损害程度成正相关，且其过度表达是全身性的；Ngb表达量与内毒素处理的时程密切 相关，Ngb 表达上调可能是在内毒素休克状态下机体内源性神经保护机制之一。实验Ⅱ 在 内毒素脑损伤大鼠模型中内毒素剂量和作用时间对脑红蛋白表达变化的影响。方法 2：按随 机单位组析因设计 2 个处理因素：即剂量因子（低剂量 0.05 mg/kg LPS 0.1 mL、中剂量 0.1 mg/kg LPS 0.1 mL、高剂量 0.15 mg/kg LPS 0.1 mL）和 3 个水平（即时间因子：12 h后检 测 Ngb 表达量、24 h 后检测 Ngb 表达量、48 h后检测 Ngb表达量）的所有组合进行的实验 设计研究。通过多功能科学计算器上的随机数字发生器将 100 只SD 随机分为对照组（n=10） 和实验组（n=90）；实验组大鼠随机分为 9 个内毒素干预组（n=10）。实验组大鼠，向大鼠 脑池内注射相应剂量的 LPS，建立内毒素脑损伤大鼠模型。对照组大鼠，向脑池内注射 0.1 ml 生理盐水。对照组于注射生理盐水后 6 h、实验组大鼠于注射内毒素后 12 h、24 h、48 h 抽取颈静脉血 1 ml，小脑延髓池穿刺收集 CSF 0.2 ml，并处死大鼠留取海马和额叶皮质。 应用酶联免疫吸附法和免疫印迹法检测标本中 Ngb 含量。结果 2：①酶联免疫吸附法显示， - 116 - 中华医学会第4 次全国重症医学大会论文汇编 壁报交流 注射内毒素后额叶皮质和海马中 Ngb 表达量随剂量增加和注射时程愈长而增高；而且内毒素 的注射剂量和作用时程对脑红蛋白的表达量的影响呈相加效果。②免疫印迹法显示实验各组 均表达相对分子质量约为 17 KD 的Ngb 蛋白。