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GS环保型病理试剂的应用及中期实验评价 (北京市病理技术学组，北京100000) 病理组织制片、染色、免疫组织化学染色、组织原位杂交及核酸提取过程中，甲醛和二甲苯作为病理 常规试剂被大量应用。这些试剂是公认的化学有毒有害高污染化学试剂，具有强烈的刺激性和挥发性，不 仅污染实验室工作环境，而且严重危害身体健康。甲醛和二甲苯等有毒有害化学试剂的回收及无害化处理 需要花费高昂的费用，而不经无害化处理直接将其排放会造成城市水系和空气的污染。随着人们对健康环 保工作和生活环境的不断关注，医务人员非常渴望建立一个环保型实验室，以减少化学药品对人类的危害。 因此，寻找一种对人体无毒无害且环保的甲醛和二甲苯理想替代品，已成为国内外病理技术工作者的一种 迫切愿望。 GS环保型病理系列试剂的短期实验表明在病理组织学形态、免疫组织化学、核酸提取和FISH方面完 全能够达到临床病理诊断的全部要求。为了考察GS系列试剂的中期技术性能，从2011年4月起我们组织 了GS系列试剂的中期实验。 一、实验设计 (GS无醛固定液及无醛无苯组织脱水系列试剂与甲醛二甲苯传统试剂短中期固定脱水效果比较评价》 课题目的。 的保存能力。 参与课题单位及实验标本选择t 北京协和医院医科院肿瘤医院北京军区总医院解放军总医院、北京大学肿瘤医院、第二军医大学 长海医院、第二军医大学长征医院、浙江大学第一附院、第四军医大学西京医院、南方医科大学病理学系 医院、郑州大学第一医院。每家医院选择乳腺癌、结肠癌、肺癌、卵巢癌、淋巴瘤、五种组织各两例，总 计110例标本。 课题设计及比较评价内容t 10％中性甲醛：固定l天、3天、7天、15天、30天、60天共取材6块 无醛型固定液：固定1天、3天、7天、15天、30天、60天共取材6块 为统一实验标准，要求取得一个足够大的标本后(要求未经固定的新鲜标本)，分成12块不小于 同时进行组化染色实验。 实验内容： PRC．erb-B2 乳腺癌．ER her-2基因荧光原位分子杂交。 结肠癌．CA．19．9 p53 肺癌一EGFR ki67 卵巢癌．CA．125 淋巴瘤一LCA CD20CD45RO 以上肿瘤的核酸提取和相关肿瘤基因的荧光实时定量荧光PCR。 关于her-2基因荧光原位分子杂交检测的说明： 阳性的时间点。 拟于2010年3月开始应于6月底基本完成实验评估。请保留实验标本蜡块，染色切片以及实验记录 数据资料。在完成实验后统一提交，以便统计分析。 关于组织脱水的说明： 10％甲醛固定的实验组织，使用传统脱水方法脱水透明； 无醛固定液固定的实验组织，使用GS系列脱水透明 二、关于环保型无醛组织固定液 1．历史回顾。 采用甲醛固定组织的方法已延续了一百多年，甲醛对组织渗透能力强，组织固定均匀，组织收缩小， 尽管它具有高毒性，但由于其成本低，能较好地保存组织结构，因此至今仍广泛被人们接受。甲醛主要存 在以下缺点：①易挥发，具有较强烈的刺激性，严重刺激呼吸道黏膜和眼结膜，强烈的刺激可引起呼吸困 难和眼睛流泪。摄入和吸入易导致中毒。严重造成空气和环境污染，而防护又极为困难。国内外医学研究 证实，人体皮肤直接接触甲醛时，会引发过敏反应、皮炎或湿疹。长期接触甲醛可能会引发慢性呼吸道疾 病和肿瘤发生，如鼻咽癌、结肠癌、脑瘤、白血病，引起体内白细胞数量下降，导致记忆力和智力下降。 2004年6月15日WHO正式宣布甲醛为致癌物质，同时提醒人们要重视甲醛的致癌性，并采取预防措施。 ②甲醛存放过久易聚合成三聚甲醛，而影响组织标本固定效果。③固定时间较长的组织内易形成甲醛色素， 与含铁血黄素相混淆，易导致组织酸化影响染色效果，使诊断受到严重影响；④不能固定肝糖原和尿酸。 ⑤废液需特殊处理，应由持证废物运输或解毒企业来处置，尽可能蒸馏回收，不能直接排入下水道。废液 抽提困难，生物学分析成功率难以确定。抽提的DNA分子的大小又与固定的温度直接相关。即使短暂的 甲醛固定切片，其DNA的溶解度也会明显降低(也会明显降低DNA的可溶性)。在固定过程中，约有 30％的核酸丢失。多项研究显示，无交联作用的醇类固定剂在保存DNA方面比醛类固定剂效果更好。但 单纯用乙醇类固定液，易导致核固缩、细胞空泡出现，组织皱缩，组织变硬变脆等缺陷。理想的固定液应