HE染色两次分化法在病理制片技术中应用探索.pdfVIP

2009年全国病理学技术进展和应用研讨会 底吹干后，直接用中性树胶封固。染色液需定期更换，特别要注意保证苏木素的染色力。 2、结果 经上述方法制作的冷冻切片，切片完整，染色清晰，核质分明，对比度好。 3、讨论 制作一张优质的冷冻切片，除了要求医生要注意取材外，技术人员必须加强责任心，做好口常的检 查工作和预防工作。通过以上对冷冻切片制作过程的探索和改进，我科的冷冻切片质量有明显提高，为 准确及时的术中快速病理诊断提供了保证。 病理切片技术的探讨 曹进王瑞国 (湖北省襄樊市第一人民医院病理科441000) 正确的病理诊断离不开一张优质的切片，优质切片标准是肉眼观切面平整、无刀痕、皱折。做 一张好的切片不容易，影响因素很多，而切片技术在其中是最基本也是最重要的一个环节。现将具体注 意事项介绍如下： ． 1、包埋好的蜡块先进行粗修，组织块的两边的蜡应修掉，上下可以保留一点以利连片，至组织大面 暴露出来，组织面向下放在冷台上或冰盒上面。 2、切片机各个部位上的活动部分如机座、刀架上紧，刀架的倾斜度一般在10。左右。 HCL， 3、选取组织块，一般带骨质、软骨以及质地较韧的组织放在后面切以免伤刀(这些蜡块可以放在IN 使组织软化，利于切片)。 4、夹紧包埋盒或蜡块，带有皮肤或浆膜的组织，皮肤及浆膜面应向上，因为皮肤及浆膜的纤维成分较 多，结构致密，硬度大，而皮下及浆膜下组织质地较疏松。 5、开始切片，先粗切至组织面完整暴露，用毛刷把蜡屑刷掉，保持工作台面洁净以防止污染。当组织块 接近刀面时，速度放缓。同时向组织面吹气，作用是防止静电。放在45℃温水后，少许的皱折就可以自 然展平，直接捞片了； 6、脂肪组织脱水不彻底的时候，不易切片，切片的厚度可以调至6-10um切片； 7、凝血块较多的组织切片易碎，组织大面切出来后可以向组织块哈气，或用手沾点温水在组织块上3— 5s，这样由于温度的变化使组织块膨胀，同时湿润也减少了薄切片时产生的静电，使破碎组织易切完整。 病理切片，每一个步骤的操作都很重要，需要我们技术人员仔细认真的工作，长期的摸索和实践， 才能真正制出高质最的切片。 HE染色两次分化法在病理制片技术中的应用与探索 陈宣世刘俊才陈勇李霞斌柴利 (泸州医学院病理教研室646000) 提供优质的组织切片是确保病理诊断准确性必不可少的重要条件。一张优质的组织切片除切片完 112 2009年全国病理学技术进展和应用研讨会 整、厚薄均匀、一层细胞、无皱折、无刀痕、无人为改变外，染色也是直接影响病理诊断的，用 传统的HE染色方法已小能满足现在要求，在HE染色过程中，分化是关键，本室对部分常规病理组织 切片、科研、教学、读片会等4万余张组织切片进行了深染重退对比染色，发现经两次或两次以上 分化染出的组织切片，无论是色彩鲜艳度，还是清晰度(以细胞核为主)，都优于一次性分化染出 的组织切片，具体方法如下： l、材料与方法 1．1材料 1．1．1实验的全部组织材料都取自于本学院附属一院、二院、三院及部分周边县、市送检组织。 1．1．2成熟Harri 液500ml、70％、80％、90％、95％酒精各500ml、100％酒精1000ml。 1．2方法 3-4um石蜡切片常规脱蜡至水洗3-5min．Harris苏木素液(室温30℃以上浸染)5-8min，(室温低 于30C入40℃裱片仪隔水加热浸染)3-5min，充分水洗。0．5％稀盐酸水溶液提洗(分化)3次，充分 水洗。 饱和碳酸锂水溶液(蓝化)10s，充分水洗。再入0．5％稀盐酸水溶液提洗(分化)2次，充分水洗。 饱和碳酸锂水溶液(蓝化)iOs，充分水洗。水片镜下观察细胞核核膜、核染色质颗粒清楚，核以外(如 细胞浆、肌纤维、结缔组织等)透亮无蓝色背景，如有蓝色背景可再入稀盐酸分化、饱和碳酸锂蓝化。 0．5-1％醇溶性伊红浸染1-2 提洗(分化)三次，95％酒精提洗3 后冷风吹干，中性树胶封固。 1．3、制片过程中注意事项 服帖紧密的组织切片烘烤时间要充分，防止脱片．脱蜡脱苯必须彻底，每周更换一次脱蜡脱苯试剂，； 流水冲洗3—5min，使组织切片