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新型可视化LAMP检测布鲁氏菌方法的建立及初步应用
潘文，李珊珊，赵明秋，琚春梅，陈金顶·
0642)
(华南农业大学兽医学院，广东广州51
isothermal
结果，作为对照的大肠杆菌，沙门氏菌、八叠球菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌、军团菌、枯草杆菌及溶血性链球菌均显示
阴性结果．扩增产物电泳图谱及AluI酶切分析验证了LAMP产物的特异性．敏感性试验显示，该方法扩增布鲁氏菌基因组DNA
X
的检测极限为10pg．用该方法检测入工污染牛布鲁氏茵的牛奶样品，检测敏感性达5．2103CFU；且该方法方法还可以对感
染布鲁氏菌小鼠的组织进行检测，为新型可视化LAMP方法的进一步应用奠定了基础．
关键词：布鲁氏菌；可视化环等温扩增；诊断
visual
Useof isotheral of for
loop—mediatedamplificationomp25 rapid
sequence
detectionof
Brucella
spp．
PAN
Wen，LIShan-shah，ZHAOChun-mei，CHEN
Ming—qiu，JU Jin—ding·
China
ofVeterinaryMedicine，South
(College AgriculturalUniversity，Guangzhou510642，China)
Abstract：Aandsensitive isothermal for Brucella
rapid loop-mediatedamplification(LAMP)methoddetecting spp．was
twosets tO
established of the visualLAMPreactionWag
using Brucella—specificprimersaccordingspecies—specificomp25gone．The
and the toberead
calcein results visualobservationofcolor ina
performedbyadding manganousion，allowing bysimple change
closed—tube whichtakeslessthan90minat63。C．The identified3Brucella didnotdetect
system，and assaycorrectly spp．strains，but
8otherbacterial Wasconfirmedtheladder-likeof andrestriction
species．Specificamplification by patterngelelectrophoresis enzyme
Alul
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