全氟辛烷磺酸对小鼠脑组织中谷氨酸含量和蛋白激酶活性的影响.pdfVIP

持久性有机污染物论坛2007暨第二届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集 全氟辛烷磺酸对小鼠脑组织中谷氨酸含量和蛋白激酶活 性的影响 王柯1，金一和1∥，于棋麟1，刘利1 (1中国医科大学公共卫生学院，辽宁沈阳，110001，2大连理工大学环境与生命学院，辽宁大连， 116024，‘联系人，Emaih jinyihe@dlut．edu．on) 1．引言 全氟辛烷磺酸(perfluorooctanesul 研究表明全球环境样品和野生动物的血清和组织样品中均可检测到PFOS。 PFOS具有脂质过氧化、内分泌紊乱、致癌性和生殖发育等毒性。在前期研究中发现PFOS能 够引起大鼠脑组织谷氨酸含量增高，从而引发神经兴奋性毒性。本研究的目的是观察PFOS对神经 系统谷氨酸含量及蛋白激酶活性的影响。 2．材料与方法 2．1试剂 ， 蛋白测定试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品。 2．2仪器 DY一96 II 公司)；JEM．1200EX透射电镜(JEOL公司)。 2．3动物分组及处理 健康雄性成年昆明系小鼠，由中国医科大学实验动物中心提供。小鼠按体重随机分为4组，每组9 BW，对照组只给予同等体积的2％吐温一80， 只。实验组PFOS染毒剂量分别是5、10、20 mg／kg 连续经口染毒lO天。末次染毒结束24小时后，低温下取脑置于干冰中快速冷冻，后置于--70℃冰 箱保存待用。 2．4待测样品前处理 2．4．1 PKC活性测定制备脑样品中1：5比例加入酶抽提液A，制成匀浆，经超声波破碎细 胞后，离心。上清液经过DEAE一纤维素柱吸附浓缩后，非放射性法测定PKC活性。 2．4．2 PKA和谷氨酸样品制备脑样品按l：5比例加入酶抽提液B，制成匀浆，经超声波破 碎细胞，分别取匀浆液100止和50止测定谷氨酸和蛋白含量。剩余匀浆液离心后，非放射性法测 定上清液中的PKA活性。 2．5电镜样品置备 心脏灌流法内固定大脑组织。低温下取大脑皮层lmm3，用2．5％戊二醛磷酸盐缓冲液固定， 制作切片。切片(厚度70pm)进行醋酸铀和柠檬酸铅染色后，透射电镜观察脑组织超微结构改变。 3．结果与讨论 PFOS 而升高(见表1)。 117 竹，’兰有Ⅳ二污采物1皇二i2¨(J7暨第二扇靖九一：有礼污瘫物奎璺拳术研一十套r!疋墨 {II’Iu、盎由对”艟她?H1中☆妇冀膏碴PK(÷1]IIKA，‘q∞嚣Em 34电镜超微结构 PFOS Smg,kgBW耀细胞段末见明显异常变化，一见1胜略锰}≯郴’强穹』．叫PFOS 10nlgCkg BW=!拦jI梭1蝣1、垭ⅢJ凹陷，染色质白至支；十1面一贯‘‘9l张，掉赝：f嚏降低国暑，PFOS 2(1ing，kg BW州缅胞巨Ifi二志j、坦则，聩稳旧1多由凹韬、坐形1q显，录垂质0自．×均≈啦浆内纠胞器蹦少， 粗m内赝网m强．薄质啻Ji低r圈玉j。 Control PFOS 5mF．Jkl!BwPFOS10md虹BWPFOS 20m．ⅣkeBW 日l’F。s史奇小阿十弛．应崖地量几瑶融结构的改生rEM．6∞fJI 4．结论 埋异常改复 致谢 30盯1 木r怍置目家曰然斟学基金项目INo 435)和辽i省敦育『j商等学饺列学技z、