膀胱癌T24中肿瘤干细胞样细胞的分离与鉴定.pdfVIP

解剖学研究2013年第 35卷第 2期 AnatRes，2013，Vo1．35，No．2 131 · 论 著 · 膀胱癌 T24中肿瘤干细胞样细胞的分离与鉴定 宁志丰， 武 倩， 司马学琴， 杨 琴， 陈拥彬 ， 丁继固， 刘复兴 (湖北科技学院基础 医学院人体解剖学教研室，湖北成宁437100) 摘【要】 目的 观察使用无血清培养基悬浮培养能否从膀胱癌 T24中分离出微球体，并证实其是否有肿瘤干细胞的 特点。 方法 使用无血清培养基 DMEM／F12添加生长因子 EGF、bFGF、胰岛素 、B27对膀胱癌 T24进行悬浮培养，并从长 期增殖能力、克隆形成能力、自我更新能力、对放化疗的抵抗能力、迁移和侵袭能力等方面证实这些微球体是否有肿瘤干细 胞的特点。结果 从培养的第 4天开始长出微球体 ，微球体细胞比普通贴壁T24细胞有更强的增殖能力和克隆形成能 力 ，对放化疗的抵抗能力更强，有更强的迁移和侵袭能力，微球体有 自我更新能力 ，具有肿瘤干细胞的特点。结论 使用 无血清悬浮培养可以从T24中分离 出微球体 ，而且这些微球体细胞有肿瘤干细胞的特点。 【关键词】肿瘤干细胞； 膀胱癌； T24； 微球体 Isolationandidentificationoftumorstem-likecellsinbladdercancercelllineT24 NINGZhi-feng， UQina，SIMAXue— qin，YANGQin，CHENYong-bin，DING矗一gu，LIUFu—xin．DepartemntofAnatomy，BasicMedicalCo池dgeofHubeiScience andTechnologyUniversity，Xianning437100，China Correspondingauthor：LIUFu—xin，E—mail：liufx6505@126．corn A【bstract】 Objective ToinvestigatewhetherwecanisolatespherefromT24usingselum—freesuspensioncultureand vanlidateitscharacteristicoftumorstem cells． Methods Weusedserum—freeDMEM／F12culturemedium supplementedwith growthfactorincludingEGF，bFGF，B27andinsulintosuspensioncultureT24．Moreover，wedemonstratedwhetherthesespere possessed characteristicoftumorstem cellsrelated to longterm proliferation ability， colonyfomr ， self—renew， resitance to chemotherapyandradiotherapy， abilitytomoveandinvadeornot． Results From the4thdayon， sphereoccu~ed， moreover， spherecellshadstrongerabilitytoproliferateandofrm clone，resistanceto chemotherapyandradiotherapy， abilitytomoveand invade，hadself-renew ability．Therefore， T24spherecellshadcharacteristicoftumorstem cells． Conclusion Itwasfeasibleto isolatespherefrom T24whenuseselum—freesuspensioncultureandthesespherecellshadcharacteristicoftumorstem cells． K【eywords】 Tumorstemceils； Bladdercancer；T24；Spheres 肿瘤干细胞是近年来的一个研究热点，它之