白藜芦醇对视网膜色素上皮细胞增殖的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30 10 ：1839．1844 · 1839 · [文章编号] 1000-4718 2014 10-1839．06 白藜芦醇对视网膜色素上皮细胞增殖的影响 王雯婕， 陈 剑 ， 刘小勇， 曲艺欣，周 清，袁晟辰，郝晓宁 暨南大学附属第一医院眼科 ，广东广州 510632 [摘 要] 目的：探讨白藜芦醇 resveratrol，Res 对视网膜色素上皮细胞增殖的影响，并初步探讨其作用机 制。方法 ：用0、50、100、150、200和300txmol／LRes作用于ARPE．19细胞24、48和72h后，CCK-8法检测Res对 ARPE．19细胞增殖的影响，0、100、150和2000~nol／LRes作用ARPE-19细胞48h，PI单染流式细胞术检测细胞周 期，AnnexinV-FITC／PI双染流式细胞术检测细胞凋亡，免疫荧光化学法检测 PCNA蛋白表达，实时荧光定量 PCR rea1．timePCR 法检测PCNA、P21和P27的mRNA表达水平。结果 ：CCK．8结果显示 ，Res抑制 ARPE-19细胞增 殖，呈时间和剂量依赖性；流式细胞术显示 ，Res使 S期细胞百分比显著上升且各组凋亡率没有区别 ；免疫荧光显 示，Res抑制PCNA蛋白表达，荧光减弱；rea1．timePCR显示 ，Res浓度依赖性地抑制PCNA的mRNA表达，而诱导 表达 1o21和P27的mRNA。结论 ：Res能抑制ARPE-19细胞的增殖，使细胞阻滞在s期，其机制可能与白藜芦醇诱 导P21与P27的mRNA表达、抑制PCNA的mRNA表达有关。 [关键词] 白藜芦醇 ；ARPE-19细胞；细胞周期；细胞增殖 [中图分类号】 R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2014．10．019 EffectsofresveratrolonproliferationofARPE-19cells WANGWen-jie，CHENJian，LIUXiao—yong，QUYi—xin，ZHOUQing，YUANSheng· chen．HA0Xiao．ning DepartmentofOphthalmology，TheFirstAffiliatedHo~itd，JinanUniversity，Guangzhou510632，China．E—mail：drch— enj@163．corn [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatetheeffectsofresveratrol Res onthepmliferati0nofARPE一19cellsandtoex- p】0犯 thepossiblemechanisms，METHODS：AfterARPE一19cellsweretreatedwithResatconcentrationsof0，50，100， 150，200nad300praol／Lfor24h，48hnad72h，theeffectsofResontheproliferationofthecellsweretestedbyCCK-8 as~ty．TheAP,PE-19ceUsweretreatedwithResatconcentrationsof0，100，150and200I~nol／Lofr48h．Theeffcetsof Resonthecellcyclenadapoptosisweredetectde byflow cytometrywihtAnnexinV-FITC／PIstaining．Theproteinexpression ofproliferatingcellnuclearnatigen PCNA wasdetectdebyimmunofluorescentassay．ThemRNAexpressionofPCNA，P21 nadP27was determinde byreal-timePCR．RESULTS：TheresultsofCCK8·assay showedthatResinhibitedhteprolifera- tionofARPE-19cellsinatime-na ddose-dependentmanner．Th etreatmentwiht Resofr48hresultedinanarrestofcell cycleatSphasewihtoutincreasingcellapoptosis．ResinhibitedhteproteinexpressionofPCNAinARPE-19celis．There‘ suitsofreal-tim