人肝癌多药耐药细胞系HepG2／ADM和其亲本细胞系HepG2蛋白质双向电泳图谱的差异分析.pdfVIP

维普资讯 ·178 · 芏复 21卷第 3期 FuBuWaiKe，Jun．2008，Vo1．21，No．3 · 实 验 研 究 · 人肝癌多药耐药细胞系 HepG2／ADM 和其亲本细 胞系 HepG2蛋 白质双向电泳图谱的差异分析 田浪 张志伟 陈孝平 【摘要】 目的 建立人肝癌多药耐药细胞系 HepG2／ADM和其亲本细胞系 HepG2蛋白质双向 电泳图谱，分析两者间蛋白质表达的差异和特点。方法 采用MTT法检测 HepG2／ADM 和HepG2 细胞对不同化疗药物的敏感性，利用双向电泳技术分离HepG2／ADM 和HepG2细胞的总蛋白质，凝 胶银染后 ，用 ImageMaster2DPlatinum软件分析两者之间的差异蛋 白。结果 相对于正常 HepG2 细胞 ，HepG2／ADM细胞表现出明显的多药耐药；HepG2／ADM和 HepG2细胞的蛋 白质点在双向电 泳图谱上的分布模式基本一致；识别了45个在两株细胞之间差异表达的蛋白质点，HepG2／ADM细 胞有25个蛋白点表达上调，9个蛋白点表达下调，7个蛋白点在 HepG2／ADM 细胞特异表达，4个蛋 白点在HepG2细胞特异表达。结论 本研究初步建立了分辨率较高、重复性较好的HepG2／ADM 和 HepG2细胞总蛋白质双向电泳图谱 ，两者之间存在一些差异表达蛋白，为进一步使用蛋白质组学 方法研究肝癌多药耐药奠定了良好基础。 【关键词】 癌，肝细胞；蛋白质组；电泳 ，凝胶，双向 DifferentialAnalysisofTwo-dimensionalGelElectrophoresisProfilesofProteinsinMultidrugResistant HumanHepatocellularCal~．JnonlaCellLineHepG2／ADM andItsCounterpartHepG2 TIAN Lang， ZHANGZhi-wei，CHEN Xiao-ping．HepaticSurgeryCenter，TongjiHospital，TongJ；iMedical College，H zhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430030，China Correspondingau旃or：ZHANGZhi～wei [Abstract] Objective Toestablishtwo-dimensionalgelelectrophoresisprofilesofproteinsin multidrugresistanthumanhepatocellularcarcinomacelllineHepG2／ADM anditscounterpartHepG2， andtoanalyzethedifferencesinproteinsexpressionbetweenthesetwocelllines．Methods MTT as～ saywasusedtodeterminethesensitivityofHepG2／ADM andHepG2todifferentantineoplastic drugs．ThetotalproteinsofHepG2／ADM andHepG2wereseparatedbytwo-dimensionalgelelectro～ phoresisandvisualizedbysilverstaining．Thedifferencesinproteinsexpressionbetweenthesetwocel1 1ineswereanalyzed by ImageMaster2D Platinum software．Results Themultidrug resistanceof Her)G2／ADM wasmoresignificantthanHepG2．Thebasicfamedistributionsoftota1proteinsinthe twocelllinesweresimilar．Forty-fivedifferentia1proteinspotsexpressedinthe