共聚焦激光显微内镜在大肠疾病中应用.pdfVIP

2007全国炎症性肠病暨消化病新进展学术大会 专题报告 共聚焦激光显微内镜在大肠疾病中的应用 山东大学齐鲁医院李延青张建娜 近年来，随着消化内镜技术的发展，出现了色素内镜(chromoendoscopy)、放大内镜 ima毋ng)等新型内镜，与普通内 (magnificationendoscopy)、窄波成像(narrow—band 镜相比，这些新型内镜的分辨率明显提高，对于胃肠道疾病的诊断准确性也明硅提高。但它 们仅限于对胃肠道黏膜表面的观察，且不能在细胞水平对黏膜进行观察。而新近发展起来的 共聚焦显微内镜能在细胞水平对黏膜表面和表面下结构进行观察。本文拟对这～新技术在大 肠疾病中的应用作一综述。 一、共聚焦显微内镜的结构和功能 共聚焦显微内镜是是将激光扫描共聚焦显微镜整合于传统电子内镜远端而成。除具有常 规电子内镜检查功能外，还能进行共聚焦显微镜检查。共聚焦显微镜适合在整块组织中对显 微结构进行观察，可产生来自标本内的连续焦平面的高分辨率的荧光图像。共聚焦显微内镜 的光学切片厚度为7pm，侧向分辨率为0．7pm。表层下Z轴范围(自粘膜表面至粘膜下的 深度)为O～250pm。其成像平面的深度由手柄上的两个遥控按钮控制。 共聚焦显微内镜的头端包含一个共聚焦成像窗口、一个常规电子内镜的物镜、一个水和 气体喷嘴、两个光导束、一个辅助喷水孔道(用于局部应用对比剂)和一个2．8ram的工作 孔道。 激光显微内镜检查时，发射至组织表面的氩离子激光激发波长为488nm，最大激光输 像素)。共聚焦图像可以与内镜图像同时生成“1。 二、荧光对比剂的应用 进行共聚焦显微内镜检查时，需使用荧光对比剂，以使成像对比鲜明。目前在人体组 织内可用的荧光对比剂有荧光素钠、盐酸吖啶黄、四环素和甲酚紫。对比剂可全身应用(荧 光素钠或四环素)，也可粘膜局部应用(盐酸吖啶黄或甲酚紫)。其中最常用的为10％的荧 光素钠和0．05％的盐酸吖啶黄。 荧光素钠是一价廉、非诱变源性的荧光对比剂，静脉应用荧光素钠后20秒内即可显像， 其作用可持续30分钟。应用荧光素钠可进行全部z轴范围的检测。为证实荧光素钠的组织 9 2007全国炎症性肠病暨消化病新进展学术大会 专题报告 分布，Odagi等。1取43例行共聚焦显微内镜检查正常的大肠粘膜，应用荧光素钠鼠单克隆 抗体进行免疫组化染色检查，结果显示阳性着色部位为问质、毛细血管肇利黏膜表面肠上皮 细胞的细胞质，但上皮细胞核和杯状细胞不着色。杯状细胞中由于含有大量的不被荧光素钠 染色的粘蛋白，表现为大而黑的细胞，非常易于辨认。虽然由于药物代谢的特点，在共聚焦 图像中不易见到细胞核，但由于共聚焦图像的分辨率非常高(侧向分辨率为O．7pm)，它允 许基于一个简单标准的肿瘤性和J}肿瘤性病变之削的快速鉴别(详见下述的不同疾病状态下 大肠黏膜的共聚焦图像特点)。 荧光素钠是早为眼科医生所熟悉的一种药物，1961年始应用于荧光素眼底血管造影。 一般的副反应足轻微的，主要是持续l一2天的皮肤和尿液的黄染。据Yannuzzi等[2】收集的 资料，荧光素恨底血管造影死f危险为1：222000，并认为是一种安全性很高的检查。 盐酸吖啶黄可使细胞核和细胞浆染色，局部应用后数秒内可被吸收，但仅局限于粘膜 表层(自粘膜表而至粘膜下lOOpm的深度)，对上皮内瘤变和癌的诊断和分级极为有利【1】。 三、不同疾病状态下大肠黏膜的共聚焦图像特点 正常人肠黏膜共聚焦图像表肌为规则分布的圆形隐窝，柱状上皮细胞闹绕着隐窝开几均 匀分布，其间有较多的杯状细胞，丌几规则。较深层图像可见腺体周围摹底膜及围绕隐窝的 毛细血管结构，虹管表现为六角形、蜂窝：状。轻一中度炎症黏膜表现为隐窝的形状、大小、 分布不均一，由于隐窝间细胞浸润增多而隐窝间距离增大(受累隐窝c50％)，局部隐窝破坏。 但杯状细胞分布正常，上皮细胞形态、排列规则，此点与肿瘤性病变明显不同。毛细血管轻 或中度增加，可见扩张和扭曲的毛细血管；重度炎症黏膜则可见明显的隐窝破坏，，50％的 隐窝问细胞浸润增加。扩张和扭曲的毛细m管明显增多，可见荧光素钠的血管外溢漏。再生 黏膜隐窝开口呈星状，或形状规则的