抗氧化营养素对NaF致大鼠肾细胞DNA损伤的干预性实验的研究.pdfVIP

第22卷 中国地方病学杂志 JuI．2003 Vol ·359- 2003年7月 ChineseJournalofEndemiology 22 [地方性氟中毒·实验研究] 抗氧化营养素对NaF致大鼠 肾细胞DNA损伤的干预性实验研究 贾丽红，孙贵范，李 昕，张颖，刘 莉，孙鲜策 O001) (中国医科大学公共卫生学院，辽宁沈阳11 [摘要]目的研究不同浓度NaF对体外培养大鼠肾细胞DNA的损伤作用及不同抗氧化营养索对氟的干 细胞凝胶电泳方法，研究NaF对肾细胞DNA的影响及这些抗氧化营养索的干预性作用。结果当NaF为025 95mm01／L的 mmoi／L时，对大鼠肾细胞DNA有明显的损伤作用；一定浓度的VC、VE、Se和GSH均能拮抗0 细胞造成的DNA损伤作用。 [关键词]氟化钠；维生素C；维生素E；还原性谷眺甘肽；亚硒酸钠 氟化物是否具有潜在致癌性仍然是目前氟健康效应研 NaF(0、025、05、1mmol／L)加入肾细胞培养液中．继续培 究的课题。许多研究证实氟可导致体外培养的哺乳细胞遗 养48h。抗氧化营养素组：将VC(50 mmol／L)预先加人到培养 传物质损伤，微核及染色体畸变。但有关抗氧化营养素干预 t。moI／L)、Se(5pmoI／L)和GSH(1 25 氟致遗传物质损伤的研究较少，本研究采用慧星实验，首先 液中．培养12h后，再与NaF(终浓度为0mmol几)一起 研究F对体外培养大鼠肾细胞DNA的影响，然后探讨不同继续培养36h。结束培养前，用0．25％胰酶处理，收集细胞， 800 抗氧化营养素拮抗F对细胞DNA的保护效应。为进一步探 r／rain离心5min，吸弃上清液，加入0 讨氟中毒的发病机制，预防和治疗氟中毒的发生与发展提供 并吹打细胞使成为单细胞悬液，经台盼蓝染色细胞存活率不 科学依据。 待测。 1材料与方法 1 23单细胞凝胶电泳方法祥见文献[1]。用目镜测微尺 1 以单盲法测定每个细胞的总慧星长度(㈣，)。以观测到的总 1主要试剂和仪器 胰蛋白酶(Difco)，RPMI640培养 液(sigma．含10％胎牛血清，10x101U／L青霉索．100mg／L 慧星长度的最小值及最大值为依据，按极差大小将全部观测 链霉素)，低熔点琼脂糖(华美公司)，正常熔点琼脂糖，还原 值分为5个组段，每个组段代表DNA损伤程度的一个级别， 随着细胞级别的增大，总慧星长度增大，DNA损伤程度增 型GSH(Japan产品)，TritonX一100(Sigma)，Tris(进口分 X—TRAIS0490胶卷，以NIKONUFXII型 大。用Superia 装)，f)L廿生育酚(a—Tocop