响应面法优化解酯假丝酵母Candida lipolytica产脂肪酶发酵条件.pdfVIP

Vo1．24 No．6 科 技 通 报 第 24卷 第 6期 NOV．2008 BULJ【ETIN 0FSCIENCEAND TECHNOLOGY 2008年 l1月 响应面法优化解酯假丝酵母 Candidalipolytica 产脂肪酶发酵条件 岳 珂 ，陈振明 ，开 雷。，陈春云 ，周晓云2 (1．杭州师范大学 生物医药与健康研究中心，杭州 310012； 2．浙江工业大学 生物与环境工程学院，杭州 310014； 3．浙江大学 材料与化学工程学院，杭州 310027) 摘 要：用响应面法对Candidalipolytica液体发酵产脂肪酶的发酵条件进行了快速优化。首先运用逐因 子试验确定 Candida 。 0产脂肪酶的最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和蛋白胨。在此基础上，通过 Plackett．Burman设计对影响其产酶相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的三个 因素：蛋 白胨 ． KH2PO，初始 pH。在用最陡爬坡试验逼近以上三个因子的最大响应区域后 ，采用响应面分析法，确定其 最优发酵条件 ：葡萄糖0．250％，蛋白胨 0．600％，KH2P0 0．603％，KH2P0 0．100％，MgSO ·7H200．050％， 橄榄油 0．500％，吐温一800．500％，初始 pH值为 7．85，转速为 180r／min，28~C培养 48h。最终优化后的酶 活达到208．9U／m1．比初始酶活 91．3U／ml提高了 129％。 关键词 ：Candidalipolztica；脂肪酶 ；PlackettB·urman设计 ；响应面法 ；优化 中图分类号：Q556 文献标识码 ：A 文章编号：1001—7119(2008)06-0810—05 ResponseSurfaceM ethodologytoOptimizeLipase ProductionFermentationConditionsbyCandidalipolytica YUEKe，CHENZhenmingI，KAILei，CHEN Chunyun2,ZHOUXiaoyun2 (1．CenterforBiomedicineandHealth，HangzhouNormalUniversity，Hangzhou310012，China； 2．CollegeofBiologicalandEnvironmentalEngineering，ZhejiangUniversityofTechnology，Hangzhou310014，China； 3．CollegeofMaterialsScienceandChemicalEngineering，ZhejiangUniversity，Hangzhou310027，China) Abstract：Response SurfaceMethodoloyg (RSM)wasused tooptimize immersionfemrentation conditionsofrlipase productionbyCandidalipolytica．Firstly，glucoseandpeptonewerescreenedoutasthemostsuitablecarbonandnitrogen sourcesusingsinglefactorexperiment．Basedonthese，designassayPlackett．Burmanwasusedtoevaluaterelativefactors relatedtolipaseproductionandthreestatisticallysignificantfactors(peptone，KH2PO4，andinitialpH)wereselected．And then steepestascentprocedureswereappliedtodefineoptimalresponseregion ofrthesethreefalctors．fi