全自动免疫组化染色仪的应用体会.pdfVIP

临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol2009Apr；25(2) ·215 · 全 自动免疫组化染色仪的应用体会 于 兰，何 松 ，陈亚丽 关键词 ：染色仪；免疫组织化学；石蜡切片 体孵育时间、操作方法 (二步法、sP法、PV9000法)DAB显色 中图分类号 ：R466．8 文献标识码：B 时间逐一编入程序内，各种一抗按各 自的效价稀释好装进试 文章编号：1001—7399(2009)02—0215—02 剂瓶内，瓶上贴好经打印机打出的标有二维码及抗体名称的 小标签。凡是当天所需的试剂都要准备好放进染色仪内，一 目前国内免疫组化多采用手工操作 ，虽有不少单位使用 切准备就绪，仪器开始运行，直至DAB显色蒸馏水冲洗后程 了全 自动免疫组化染色仪 ，但是使用大容量全 自动免疫组化 序结束。从切片上机、缓冲液冲洗开始，至滴加、孵育一抗二 染色仪的报道少见。我们通过摸索实践，在以往手工操作的 抗及 DAB显色 ，这些工作都是由全 自动免疫组化染色仪完 基础上，充分利用全 自动免疫组化染色仪流程的优点 ，密切 成。取下切片送全 自动常规染色仪 (LeieaST5020)进行苏木 注意染色过程中所出现的问题并加以改进，加强对仪器的保 精复染 (启用的是免疫组化复染程序和标识物)，复染后仪 养维护，确保免疫组化染色质量的稳定性。现将体会介绍如 器会 自动送切片至LeieaCV5030全 自动封片仪封片。 下。 2 结果 1 材料与方法 经全 自动免疫组化染色仪进行免疫组化标记 ，速度快、 1．1 材料 用APES与丙酮 1：50混合液处理过的防脱载 效率高、可批量处理、重复性强、标准化程度高、利于质控。 玻片常规制备待检组织切片，进 口专用标签，专用油笔或唇 同时大大节约了人力，避免 了手工操作时 DAB显色液对工 膏。 作人员的危害，符合环保要求。 1．2 仪器设备 美国LABVision720全 自动免疫组化染色 3 体会 主机 (含二维码识别及精确定量升级模块)，附件有 Dell电 脑及免疫组化操作流程软件、美国TLP3842标签打印机、 与传统的手工操作相比，全 自动免疫组化染色仪的优越 SANTAK稳压器、插片架 、高压锅、电炉、15ml试剂塑料瓶、 性明显高于前者。免疫组化操作步骤多，每一个环节都可能 50 容量的塑料桶2只(装缓冲液和蒸馏水用)。 影响标记结果。例如传统手工操作中每一步都要用缓冲液 1．3 试剂 一抗、二抗、SP法试剂盒、PV90001、PV90002、 冲洗 3遍 ，再用吸水纸吸去组织周边的水分，否则抗体既可 DAB显色液、磷酸盐缓冲液 (0．01mol／L的PBSpH7．2～ 能流失 ，又可能稀释；手工操作时如果抗体滴不到位或者组 7．4加吐温2O，每2000ml缓冲液加 1ml吐温20)、EDTA修 织稍有干燥 ，结果会造成背景深，边缘反应重，影响诊断。手 复液 (EDTApH8．0加蒸馏水，1：50)或 0．01mol／LpH6．0 工操作速度慢，效率低。而使用全 自动免疫组化染色仪时此 枸橼酸盐缓冲液。 类问题的出现机率极低。因为只要把前序工作做好，标记结 1．4 操作流程 切片常规脱蜡至蒸馏水，根据不同的一抗 果就比较顺利，背景清晰，定位 良好 ，无边缘反应。每批次能 选择不同的修复液，经高压锅高温修复3min待 自然冷却 ， 做84张切片，3h左右就能完成。但是再好的设备也必须使 蒸馏水冲洗后浸泡在缓冲液内 10min备用。打开电脑 (内 用得当，因此，我们的使用体会是 ：(1)机器出