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临床与实验病理学杂志
· 762 · 临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol 2011Jul;27(7)
5.3.2 真阴性的结果 整个染色过程没有出现问题,组织
5 免疫组化规范操作
或细胞确实不表达与抗体相关的抗原。
5.3.3 假阴性的结果 即此阴性结果不是真实的反映。切
免疫组化是一个多步骤、多条件的复杂过程,每一步骤
都会影响最终的结果。因每一步骤都有其特定的条件,应严 片中根本就不包含所预期检查的组织或细胞。染色过程中
格按照特定的条件进行操作。对结果影响较大的因素主要 的某一或某些环节出现问题。比如,组织未进行抗原修复,
为是否进行热修复和抗体的问题 。 因为有的组织必须经过抗原修复才能检测抗原表达;选用了
5.1 修复的问题 关于抗原是否修复,存在着不同的意见。 只能用于冷冻组织而不能用于石蜡包埋组织的抗体;一抗失
欧洲专家一致认为不能进行,以免产生假阳性,而美 国学者 效,虽然抗体失效在理论上是一个逐渐的过程。但偶尔也遇
的意见是需要进行,中国专家组推荐可以进行修复。如 到突然失效的情况,抗体长期不用和 (或)已超过有效期是
CD117(DAKO、A4502、1:400),采用EnVision两步法,柠檬 主要的原因。
酸缓冲液(pH6.0),使用高压锅进行免疫组化热修复。具 5.3.4 解决阴性染色的措施 在免疫组化操作过程中设立
体的操作程序:将切片放在金属架上 (不宜太密);高压锅加 “阳性对照”。如果阳性对照有了表达,说明染色的全过程
入0.01mol/L枸橼酸钠缓冲液 3L,煮沸 ;金属架放在枸橼 和所有试剂都没有问题。通过观察组织的内对照,也可以进
酸钠缓冲液内,加盖,加压 1~5rain;自来水浴冷却高压锅; 行判断。如CD117(DAKO、A4502、1:400),可以从肥大细
自来水洗,riffs缓冲液冲洗。 胞的染色情况来判断是免疫组化过程中出了问题还是本身
5.2 抗体的问题 免疫组化一般多选用单克隆抗体,单克 组织就不表达 CDI17。因为正常的肥 大细胞可 以表 达
隆抗体的效果好于多克隆抗体。抗体的效能,工作液使用方 CD117,主要在细胞膜或胞质表达。
便,但是长时间放置后效能降低。
参考文献:
5.3 免疫组化染色分析
5.3.1 染色的结果 一般可分为两类:无色片 (即无阳性信 [1] 王伯 ,李玉松,黄高舁,等.病理学技术 [M].北京:人民卫
号)和 “杂音”染色片 (有阳性信号)。免疫组化阴性情况,即 生出版社,2000:354—66.
染色结束后 ,切片中无任何阳性信号。这是常规工作中比较 [2] 吴秉铨,刘彦仿,主编.免疫组织化学病理诊断 [M].北京:科
常见的现象,出现这样的情况有两种可能:真阴性的结果和 学技术出版社,2007:15—22.
假阴性的结果。
· 国外期刊文摘 ·
神经营养性酪氨酸激酶受体 1和2 NTRK1可在71.6%(194/271)的肺鳞状细胞癌中表达,相比
于其他组织学类型,NTRK1对肺鳞状细胞癌诊断的特异性
可用于区分肺鳞状细胞癌和非鳞 和敏感性分别为92.8%和71.6%,3例腺鳞癌中2例鳞癌部
状细胞癌 分表达 NTRK1,6/55例大细胞癌、11/236例腺癌和 1/93例
类癌中表达NTRK1,而细支气管肺泡癌、多形性癌、大细胞
TerryJ,De Luc
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