肾穿刺活检六胺银染色套染Masson染色方法的改良.pdfVIP

临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol 2012Nov；28(11) ·1289 · 肾穿刺活检六胺银染色套染Masson染色方法 的 改 良 吕增华，张杨杨，朱玉红 关键词：肾穿刺活检；六胺银染色套染Masson染色法 1．1 组织来源及处理 选取临床 肾脏穿刺活检标本 120 中图分类号：R446 文献标志码 ：B 例。所有组织均用PB—FA液 (40％甲醛 1Oml、无水乙醇70 文章编号：1001—7399(2012)11—1289—02 ml、0．01mol／L、pH7．2PBS溶液20m1)固定。脱水、透明、 浸蜡、包埋(浸蜡和包埋用蜡系熔点 60℃，溶解过滤后使 肾穿刺活检是 目前诊断肾小球肾炎最可靠的手段 ，在。肾 用)。整个过程在 3h内完成。包埋时务必将组织拉平 ，所 脏穿刺活检病理诊断中，六胺银染色套染 Masson染色…能 有组织须在同一个包埋面上 ，切片厚 1 m，64℃烤箱烤片 精确显示病变肾小球内各种免疫复合物的形态与定位 ，对诊 30—40 min。 断肾小球疾病起着至关重要的作用。然而，此方法仍然存在 1．2 储存液的配制 按照说明书将国药公司生产的粉装试 制片时间长、染色效果不稳定等缺点 ，远不能满足临床需要。 剂配制成储存液，步骤如下：(1)3％六次 甲基四胺(乌洛托 为此，本组实验对临床送检的120例肾脏穿刺标本，以传统 品)水溶液 ；(2)5％硝酸银水溶液棕色瓶装；(3)0．2％氯化 的六胺银染色套染 Masson染色方法为基础，在切片染色时 金水溶液，前3种储备液4℃冰箱保存备用 ；(4)5％硼砂水 溶液；(5)0．25％硫代硫酸钠水溶液，(4)和(5)室温保存备 间、方法和质量上进行了改进 ，现介绍如下。 用；(6)Masson复合染液 (酸性复红 1g，丽春红2g，橙黄G2 1 材料与方法 g，0．25％醋酸300m1)；(7)0．1％固绿水溶液，(6)和 (7)室 温避光保存备用。 1．3 染色步骤 (1)切片常规脱蜡至水，蒸馏水洗 ；(2)擦 收稿 日期：2012—07—12 干组织周围蒸馏水，滴加 3％过碘酸水溶液20min，蒸馏水 作者单位：滨州医学院附属医院病理科，山东 滨州 256603 洗3次；(3)滴加预温的六胺银工作液，水浴60～65 染色 作者简介：吕增华，女，副主任技师。Tel：(0543)3256654，E—mail 20min左右(大号培养皿去盖先放入水浴锅预热，将组织切 bzlzh2010@ 163．eom 片放入培养皿 ，并滴加预温的六胺银工作液，在切片上加一 张杨杨，女，技师，通讯作者。E—mail：zy163 塑料盖)，镜下示肾小球基膜呈明显黑色 ，蒸馏水洗3次 ； Cnm 号为鲜红色。本组实验对两种不同显色方法进行对 比，结果 究发现使用氧化物酶组织化学的显色剂 ，可以使显色时间持 示DAB显色操作 比较简单 ，室温下即可显色，显色时间较 续更久。 快；显色后切片可用二甲苯透明，切片较干净 ，组织透明度较 上述两