糖尿病小鼠血糖波动模型的建立及其对脏器损伤的研究.pdfVIP

第47卷 第 5期 复 旦 学 报 (自然科学版) VOi．47No．5 2008年 10月 JournalofFudanUniversity(NaturalScience) OCt．2008 文章编号：0427—7104(2008)05—0647—05 糖尿病小 鼠血糖波动模型的建立 及其对脏器损伤 的研究 涂 睛，翁宇静，童 智，叶希韵 (华东师范大学 生命科学学院，上海 200062) 摘 要：通过建立糖尿病小鼠的血糖波动模型，研究血糖波动对糖尿病小鼠各脏器氧化损伤以及对糖尿病并发 症相关实验指标的影响．将实验小鼠分为四组，正常组小鼠、正常小鼠血糖波动组、糖尿病小鼠组、糖尿病小鼠血 糖波动组．首先通过尾静脉注射四氧嘧啶5mg／kg体重建立小鼠糖尿病模型，正常波动组和糖尿病波动组每天 3次腹腔注射葡萄糖2g／kg体重以造成小鼠的血糖波动，其余两组腹腔注射生理盐水，各组小鼠均 自由进食进 水．实验6周后采血，检测血清中血糖、果糖胺含量以及各脏器中丙二醛、谷胱甘肽、山梨醇等的含量．糖尿病波 动组小鼠的血糖、果糖胺水平、各脏器的氧化损伤程度和山梨醇含量都显著高于糖尿病组(P0．01)．说明血糖 波动能加重糖尿病小鼠的病情，并对脏器造成更为严重的损伤，这有可能是导致糖尿病并发症发生的原因之一． 关键词：血糖波动；糖尿病小鼠；糖尿病并发症 ；氧化损伤；模型建立 中图分类号：R587．1 文献标识码：A 高血糖是糖尿病的标志以及导致慢性并发症的主要原因，高血糖的不 良作用主要是以慢性持续高血 糖和血糖水平波动两种方式体现的…1．近年来有研究报道_2J，糖尿病的预后及慢性并发症的发生和发展 不仅与整体血糖水平的升高密切相关，而且与患者的血糖波动有密切关系．糖尿病患者血糖波动越大，慢 性并发症的发生率越高、预后就越差．临床研究显示l3J，长期的血糖波动比慢性持续高血糖对人体的危害 更加严重．体外细胞培养研究还发现l4喝j，间歇性葡萄糖浓度波动会导致肾小球系膜细胞 ，血管内皮细胞 等发生不同程度的损伤．由于糖尿病病人一天中的血糖浓度是呈锯齿形不断变化的，餐后血糖水平快速升 高是糖尿病病人典型的、常见的临床症状．本文通过模拟餐后高血糖引起糖尿病患者血糖波动的情形，建 立了糖尿病小鼠的血糖波动模型，初步研究了血糖波动对糖尿病小鼠肾脏、肝脏、心脏的氧化损伤情况，以 及对血糖、果糖胺、山梨醇含量的影响，旨在通过动物实验进一步探讨血糖波动对糖尿病小鼠造成的危害， 以及血糖波动与糖尿病并发症之间的关系，为今后深入的机制研究打下一定的实验基础并提供了可操作 的实验动物模型． 1 材料与方法 1．1 药品与试剂 葡萄糖 (GLu)购 自上海化学试剂公司；四氧嘧啶(Alloxan)购 自Sigma；辅酶工(NAD )购 自上海鼎国 生物科技有限公司；葡萄糖氧化酶法测定试剂盒和果糖胺试剂盒购 自上海科欣生物技术研究所；丙二醛 (MDA)试剂盒和谷胱甘肽(GSH)试剂盒购 自南京建成生物工程研究所．其他化学药品均为国产分析纯． 1．2 实验动物 雄性昆明小鼠，体重在25～30g，中科院上海斯莱克实验动物有限公司，许可证号：SCXK(沪)2003— 0003． 收稿 日期：2008—01—21 作者简介：涂 睛(1982一)，男，硕士研究生；通讯联系人 叶希韵，女，副教授 ，E-mail：xyye@bio．ecnu．edu．cn 复旦 学 报(自然科学版) 第47卷 1．3 糖尿病小鼠模型的建立方法 从60只雄性昆明小鼠中随机各取出8只作为正常组和正常波动组．其余所有小鼠禁食 12h后， 尾静 脉注射以0．9％的生理盐水配制的5mg／mL四氧嘧啶溶液，注射量为50mg／kg体重，5d后， 禁食 6h取 小鼠尾静脉血用葡萄糖氧化酶法测定试剂盒测血糖值．选取血糖值介于 16～20mmol／L的小鼠16只作 为糖尿病组和糖尿病波动组． 1．4 实验分组 正常组(N)、正常波动组(F)、糖尿病组(M)、糖尿病波动组(M+F