红花石榴二氢黄酮醇还原酶(DFR)基因cDNA片段克隆和序列分析.pdfVIP

山东农 业 科 学 2012，44(2)：1-4 ShandongAgriculturalSciences 红花石榴二氢黄酮醇还原酶 (DFR)基因 eDNA片段克隆及序列分析 招雪晴，苑兆和 ，陶吉寒，尹艳雷，冯立娟 (山东省果树研究所 ，山东 泰安 271000) 摘 要 ：二氢黄酮醇还原酶 (DFR)是植物花色苷生物合成途径中的关键酶。以红花石榴 “泰山红”的花 瓣总RNA为模板 ，利用简并引物 ，采用RT—PCR方法，扩增出一条长446bp的eDNA片段，序列分析结果表 明，该eDNA片段与GenBank中的甜樱桃、葡萄等物种的DFR氨基酸同源性为78％～81％，说明该二氢黄酮 醇还原酶片段为石榴花DFR基因的eDNA片段 ，GenBank登录号为JN316028。 关键词：石榴；DFR基因；克隆；序列分析 中图分类号：Q785 文献标识号：A 文章编号：1001—4942(2012)02-0001-04 CloningandSequenceAnalysisofcDNA FragmentofDFR Gene from Red—flowerPomegranate ZHAOXue—qing，YUANZhao—he ，TAOji—hart，YINYah—lei，FENGLi—juan (ShandongInstituteofPomology，Taian271000，China) Abstract Dihydroflavonol4一reductase(DFR)isthekeyenzymeinthebiosynthesisofanthocyanidins． WiththetotalRNA from red—flowerpomegranate “Taishanhong”astemplateandusingdegenerateprimers，a neweDNA fragmentof446bpwasamplifiedbyRT—PCR．Thesequenceanalysisdemonstratedthatthede- ducedaminoacidsequenceshared78％ 一81％ homologywiththatofsweetcherry．grapeandetc．Thesere· sultssuggestedthattheclonedeDNAfragmentwasfrom DFRgeneofred—flowerpomegranate，anditsacees- sionnumberinGenBankwasJN316028． Keywords Pomegranate；DFR gene；Clone；Sequenceanalysis 植物的色泽呈现与类黄酮代谢密切相关 ，其 各异，因而，DFR基因是花色改 良的关键基因之 中，花色苷是广泛存在于被子植物中的一类重要 一 0 0’Reilly等 l【采用转座子标签技术首次从 的类黄酮化合物，是植物叶、花、果呈色的物质基 玉米(Zeamays)中分离克隆出DFR基因，随后从 础 ]。与花色控制相关基因的克隆已在百合 J、 金鱼草(Antirrhinumm~ju,)¨和矮牵牛 (Petunia 连翘 、洋桔梗 、金鱼草 、菊花 、水仙 、蝴 hybrida)12]中也克隆到了DFR基因。 蝶兰 ]、彩叶草 J、梅花 ¨等多种植物上有所报 石榴(PunicagranatumL)属石榴科石榴属， 道。二氢黄酮醇还原酶 (DFR)是花色苷合成途 在我国已有2000多年的栽培历史。因果实中含 径中后期表达的第一个关键酶，在不同花色形成 有花色苷、鞣花酸、安石榴甙等酚类物质 ，具有 中起着关键作用。由于不同物种的DFR对底物 极高的营养保健功效而成为重要的功能水果。同 选择性不同，所以合成的花色素不同，呈现的花色 时