视网膜母细胞瘤细胞系HX—b抑癌基因表达OR甜.pdfVIP

1一 l - l】2 - Chl口OohthalRes．ADdI1999．Vo]17．No2 · 实 验 研 究 · 视 网膜母细胞瘤细胞系 HXO—Rb甜抑癌基 因的表达 d 巡 罗成仁 Theexpressionoftumorsuppres~rgenein theretinoblastomacelllineHXO-Rb． ZhangXiao~ei，Chert皿耐∞ ， cm g,~n．Departmentof啦 ，theFirstUnizersity 咖 f， WestChinaUniverseofMed~／lSce／nces，Chug610041 7习、7晓 A1洲 0啦 6 Todetect expressionofthe*flllnorsuppressorgeneRbintheretinoblastoma(RB)celllineHXO-R h thehlllh~l-studyofRB pathogen~isandprovld~ngexptmmenlaibasisfortheRbgenetherapyofRB invlvo． M目 SP immtmohistochemistry(IHC)Wa$appli~ forthemor~ losicalobser~,atlon—queryand localization detection and indirect mmamofluo,~scenceofflowcytometry(FCM)forthequantitativedetectionoftheexpressionofRbgene Rt~alts IHCdefection sho~edthe Ⅱveexpre~onofRbproteinwithdark—yellowstaininginthenucleiofthem『rm日Iretina ssI|es．WhereasmostRBcellsin HXO-R~ Wereneg estairIingofRbproteinFCMquantitativedetectioninHXO-R~,shov,edmuchlowerexpressionc叫 lll ilocmaltissues，andthepositiveexpressmnofRbgeneinIIOII~3K]lym@ocyte~㈣ 371dl asnloi~a8inRBcellsinHXO-R ． Ⅲhl OurresultsitMicatethatthelossoffunctionofthewildtypeRbgenew∞ foundinthe础 celllineHXO-Rb．andtie mutationofwddtypeRbgenewascloselyrelatedtotheRBfomuaion Keywords celll retinoblastoma Rbgene Rbprotein immunohistoehemistry n cytometry 摘要 目的 捡测视网膜母细胞瘤 (础 )细胞系 HXO-R 中抑癌基因 Rb的表达状况，为进一步研究 RB的发病机 制 ，利用抑癌基因Rb进行础 的基因治疗提供实验依据。 方法 用 印免疫组织化学 (珊c)及流式细胞术 (FCM)问接免 疫荧光法对 Rb基因的表达进行定性 、形态学定位及定量检测。 结果 IHC法检测显示 ：正常视 网膜组织中 Rb蛋 白呈 阳性反应，位于细胞核呈棕黄色；ttXO-1~a．中 Rb蛋 白表达阴性 。FCM检测显示：正常人淋巴细胞 Rb蛋白表达量是 HXO- R 细胞的371倍 ．HXO-R~ 中Rb蛋 白表达量扳低。 结论 RB细胞系HXO-R 中存在野生型 Rb基因的功能失活，Rb 基因的突变失活与RB的发生密切相关。 缅 美键词 细胞系 视网膜母细胞瘤 Rb基因 Rb蛋 白 免疫组织化学 流式细胞术 分类号R774 墨瞅 视 网膜母细胞瘤 (refinoblastoma，