GMA致人支气管上皮细胞恶性转化过程中抑癌基因P15甲基化状态及研究.pdfVIP

GMA致人支气管上皮细胞恶性转化过程中抑癌基因P15 甲基化状态的研究 许建宁1,2 王全凯1，2 王安娜1，2胡洁1 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所，北京1000502中国疾病预防控制中心化学污染与健 康安全重点实验室，北京100050 目的：观察甲基丙烯酸环氧丙酯(glycidylmethacrylate，GMA)致人支气管上皮16HBE细胞恶性转化过程中不同 时点P15基因甲基化状态，并探讨其在细胞恶性转化过程中的意义。方法：结合甲基化芯片结果，收获GMA转化前期 （第 10代）、转化中期 （第20代）、转化后期 （第30代）16HBE细胞，应用甲基化特异性PCR(MSP)技术分析该基因在GMA 诱导16HBE细胞恶性转化不同阶段甲基化状态。结果：甲基化芯片结果显示，P15基因在转化中期、转化后期出现甲基化 而转化前期未见甲基化，经MSP法检测结果与芯片结果一致。结论：P15基因在转化中、后期发生甲基化，推断P15基因 甲基化可作为该细胞恶性转化过程中的一种特殊的基因突变的方式，可能是该细胞模型发生恶性转化的原因之一。 甲基丙烯酸环氧丙酯；人支气管上皮细胞；恶性转化；甲基化 StudyontheAnti-oncogeneofP15methylationstatusinMalignant TransformationHumanBronchialEpithelialCellsInducedby GlycidylMethacrylate XUJian-ning1,2WANGQuan-kai1,2WANGAn-na1,2HUJie1 NationalInstituteofOccupationalHealthandPoisonControl,ChineseCenterforDiseaseControland Prevention,KeyLaboratoryofChemicalSafetyandHealth,ChineseCenterforDiseaseControlandPrevention, Beijing100050,China OBJECTIVEAnalyzing the changes ofP15methylationstatus amongdifferentstagesof malignanttransformationofhumanbronchialepithelialcells(16HBE)inducedbyglycidylmethacrylate(GMA) anddiscussingtheDNAmethylationintheprocess.METHODSCellswereharvestedondifferenttimes, protophase (the10thgeneration),metaphase(the20thgeneration) andanaphase (the30thgeneration) transformedcells.ThenthesemethylationstatusesofP15weredetectedbyMethylation-specificPCR (MSP); moreover,italsocontrastedtothecontrolgroups (treatedwithDMSO) onthesamegeneration.RESULTS Basedontheresultofmethylationchip,indifferentmalignanttransformingstages,which16HBEcellsinduced byGMA,P15geneallappearedabnormallymethylation.ItwasthatP15genemethylatedbothinmetaphaseand anaphasebutnotinprotophase.CONCLUSIONMethylationstatusofP15wasspecificinthedifferentmalignant transformingstagesof16HBEcellsinducedbyGMA,itcanbeinferredthatP15canbeusedasthereasonand particularmu