脐带血干细胞移植对乙型肝炎肝硬化失代偿期患者T淋巴细胞亚群影响探讨.pdfVIP

肝纤维化·肝硬化 脐带血干细胞移植对乙型肝炎肝硬化失代偿期患者 T淋巴细胞亚群影响的探讨 柳州市中医院消化科(545001) 周晓冷谢胜侯秋科 【摘要】目的探讨脐带血干细胞移植对乙型肝炎肝硬化失代偿期患者T淋巴细胞亚群的影响。方法40例乙型肝炎肝硬 化失代偿期患者，采取介入(经肝固有动脉)输注途径移植脐血干细胞，于移植术后l、2、3个月采用流式细胞仪检测T淋巴 细胞亚群的变化情况，并与治疗前相比较。结果 分比及CD4+／CD8+T淋巴细胞较治疗前明显增加，差异均有统计学意义妒0．05)。结论脐带血干细胞移植治疗可改善乙 型肝炎肝硬化失代偿期患者体内T淋巴细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱的状态。 【关键词l干细胞； 移植； 肝硬化； 失代偿期； T淋巴细胞亚群 肝硬化是临床常见病，该病进入失代偿期后进展迅速，最终可能导致肝功能衰竭。原位肝移植是目前治疗 终末期肝病的最理想方法，但缺乏供体、手术费昂贵和长期使用免疫抑制剂等因素阻碍了其应用。目前，干细 胞研究在医学领域取得了瞩目的成就。间充质干细胞作为一种多能干细胞，具有横向分化能力，在一定的实验 条件下可分化为肝细胞。脐血有充足的间充质干细胞来源，且脐血的免疫原性较弱，其间充质干细胞更为原始， 扩增能力更强，故作用越来越突出，可作为一种新的替代细胞来源用于各系统疾病的细胞移植，这也为终末期 肝病的治疗提供了新思路。目前认为宿主免疫调控紊乱是导致慢性肝损伤的主要原因。我们对移植术后1、2、 3个月外周血T淋巴细胞亚群的变化情况进行研究，以期了解的脐带血干细胞移植对失代偿期肝硬化患者T淋 巴细胞亚群的变化规律及其临床意义。 资料与方法 住院患者，诊断符合病毒性肝炎防治方案…中的肝硬化诊断标准。其中女陛18例，男性22例；年龄27～72岁， C级15例。 2．术前准备：患者人院后均行内科对症治疗，包括保肝、利尿及必要时腹水超滤回输等，术前行肝脏生物化学、 病毒学检查及肝脏CT检查，并排除肝癌。所有治疗措施都在患者知情同意并签署《知情同意书》情况下进行。 3．脐血采集及分离：选择足月产妇，产前检查正常；产后无新生儿畸形；产后留脐血80～120ml存于专 用脐血袋，2～4℃保存，不超过12h。在万级洁净实验室百级超净工作台内，由从事细胞分离的专业人员按 试剂盒说明书要求分离脐血干细胞，储存在专用试管中，置2～4℃容器内不超过1h，留取0．2Inl做细胞计数、 细菌培养、内毒素检测、流式细胞仪检测等。干细胞终制品有核细胞存活率96％，有核细胞收集率85％， 有核细胞收集计数2．0×109。 4．移植方法及术后处理：在介人治疗室内，经股动脉穿刺插管，置管于肝固有动脉进行lISA造影，观察 肝内血管I青况及有无占位陛病变；经肝固有动脉将分离好的干细胞悬液10111l缓陧注入(2ml／min)，术毕拔管， 穿刺点加压包扎后返回病房。术后股动脉穿刺点压迫止血12h，穿刺侧下肢制动6h。术后常规监护。继续抗病毒、 保肝及对症支持治疗。 5．检测指标及方法：治疗前及治疗后1、2、3个月，流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群，所有受试者均清 晨抽取空腹外周血2111l，肝素抗凝(1h内进行检测)。按T淋巴细胞亚群免疫荧光检测试剂盒说明进行操作(购 于德国Partec公司)，测定CD4+和CD8+T淋巴细胞，结果采用FloMax专用软件进行分析。 第八届全国肝脏疾病临床学术大会 6．统计学方法：采用sP鼢3．0统计软件分析，数据以均数±标准差G±s)表示。 结 果 外周血T淋巴细胞亚群的比较见表l 衰1两组治疗前后T淋巴细胞亚群比较反土s，力=40) 注：与术前比较，a尸O．05，与术后2月比较，b尸0．05 讨 论 肝硬化为临床常见病，—直以来缺乏有效的治疗手段。原位肝移植是目前较为有效的治疗方法，但受限于 供体肝的缺乏、移植后的免疫排斥反应及高额治疗费用而难以普遍开展。干细胞移植是当今世界上最前沿、最 热门的医疗新技术之一。近两年，