广谱抗稻瘟病基因Pi9对籼稻的转化的研究.pdfVIP

分子植物育种，2006年，第4卷，第5期，第650-654页 MolecularPlantBreeding,2006,Vol.4,No.5,650-654 研究报告 ResearchReport 广谱抗稻瘟病基因 对籼稻的转化研究 Pi9 1,2 1,2* 2 2,3* 潘素君 戴良英 刘雄伦 王国梁 1湖南农业大学生物安全科技学院,长沙,410128;2湖南农业大学水稻基因组学实验室,长沙,410128;3美国俄亥俄州立大学植物生理实验室, 哥伦布,俄亥俄州,43210 *通讯作者,liangying-99@;wang.620@ 摘 要 通过农杆菌介导法，将由CaMv35s启动子启动的广谱抗稻瘟病基因 转入5个籼稻品种 (丰源 Pi9 B、湘晚籼 13号、R996、527、1701)的愈伤组织中，所用质粒为pCAMBIA1301，pCAMBIA1301的T-DNA区 含有潮霉素(hygmycin)抗性基因和 -葡萄糖苷酸酶(GUS)基因。以潮霉素作为筛选剂对籼稻愈伤组织进行 β 筛选，结果表明，不同品种在转化过程中抗性愈伤率在73.9%~83.3%之间，获得的部分抗性苗经PCR检测为 阳性，阳性植株的转化率差异显著，其转化率为5.7%~25.9%之间，对获得的抗性苗和T代幼苗的根和叶进 2 行GUS组织化学染色分析，有些抗性苗和T代幼苗的根和叶呈蓝色反应，表明广谱抗稻瘟病基因 基因 2 Pi9 已整合到水稻基因组并能正常表达。对T代进行稻瘟病小种接种试验，结果显示了抗性分离。并且建立了一 2 套较为有效的水稻遗传转化体系。 关键词 广谱抗稻瘟病基因 ,籼稻,农杆菌介导法,抗性分离 Pi9 TransformationoftheBroad-spectrum BlastResistanceGene into Pi9 IndicaRice 1,2 1,2* 2 2* PanSujun DaiLiangying LiuXionglun WangGuoliang 1TheCollegeofBio-SafetyScienceandTechnologyofHunanAgriculturalUniversity,Changsha,410128;2TheRiceGenomicsLabofHunanAgri- culturalUniversity,Changsha,410128;3DepartmentofPlantPathology,TheOhioStateUniversity,Columbus,Ohio,43210 *Correspondingauthor,liangying-99@;wang.620@ Thebroad-spectrumblastresistancegene controlledbypromoterCaMv35swassuccessfullyintro- Abstract Pi9 ducedintothecallioffiveindicacultivars (FengyuanB,Xiangwanxian13,R996,527,1701)basedontheA- grobacterium-mediatedmethod.TheplasmidispCAMBIA1301,theT-DNA ofpCAMBIA1301contains hygmycin-resistantgeneand gene.73.9%~83.3%o