BoxBehnken效应面法优化侧柏叶总黄酮提取工艺.pdfVIP

第38卷第1期 云南中医学院学报 VoI．38No．1 ofYunnan ofTraditionalChineseMedicine 2．2015 2015年2月 Journal University Box—Behnken效应面法优化侧柏叶总黄酮提取工艺 丘思兰1一，谭志灿弘，黄洁靖3，利创华2,3 (1．广州医科大学附属第五医院，广东广州510700；2．广州中医药大学，广东广州510405； 3．广州市医药职业学校，广东广州510430) 摘要：目的优选侧柏叶总黄酮的提取工艺条件。方法 以总黄酮提取率为指标，通过Box—Behnken效应面 法考察乙醇浓度、溶剂体积、提取时间对提取工艺的影响。结果最佳提取工艺为加15．70倍量75．44％乙醇，提取2 次，每次86．46min。侧柏叶总黄酮提取率1．6728％．结论优选的提取工艺稳定可行，数学模型的预测值与试验观 察值相符。 关键词：侧柏叶；总黄酮；提取工艺；Box—Behnken效应面法 中图分类号：R284．2 文献标志码：A 文章编号：1000—2723(2015)01—0031—03 侧柏叶，别名柏叶、扁柏叶、丛柏叶，为柏科植 均为分析纯。 orientalis(L．)Franco的干燥枝梢2方法与结果 物侧柏Platycladus 和叶。一般在夏、秋二季采收，阴干，我国大部分地 2．1侧柏叶总黄酮的含量测定 区均有产。侧柏叶味苦、涩，性寒。归肺、肝、脾经。具 2．1．1 对照品溶液的制备 有凉血止血，化痰止咳，生发乌发的作用。用于吐 精密称取槲皮苷对照品12．05mg，置25mL量瓶 血，衄血，咯血，便血，崩漏下帆，肺热咳嗽，血热脱 中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。含槲皮 发，须发早白等症【11。 苷0．482mg／mL。 侧柏叶主要含有黄酮类化合物、挥发油、鞣质 2．1．2供试品溶液的制备 等成分酬。现代药理研究表明，侧柏叶具有抑菌、止 精密称取侧柏叶药材粉末19，置50mL圆底烧 血、抗肿瘤、抗炎、抗红细胞氧化等作用[5-Ol。侧柏叶瓶中，加石油醚25rnL，回流脱脂两次，每次2h，取药 的主要药效成分为黄酮类化合物。本实验采用Box— 渣干燥，并按照表1试验设计制备供试品溶液。 2．1．3标准曲线的绘制 Behnken效应面法对侧柏叶总黄酮的提取工艺进行 研究，为充分发挥其药用价值提供实验依据。 精密吸取上述槲皮苷对照品溶液 1仪器与材料 SP一756PC型紫外一可见分光光度计(上海光谱加乙醇至6mL，加5％亚硝酸钠溶液lmL，摇匀，放 仪器有限公司)；HH一8型数显恒温水浴锅(金坛市 成辉仪器厂)；ALl04型电子分析天平(上海梅特勒加4％氢氧化钠溶液lOmL，再加水至刻度，摇匀，放 托利多仪器有限公司)。 置15min，以相应试剂为空白对照，照紫外一可见分 侧柏叶药材购自广东和翔制药有限公司(批号 光光度法(《中国药典)20LO年版一部附录VA)，在 最大吸收波长500hm处测定其吸光度A，以吸收度 ，经鉴定为柏科植物侧柏Platycladus orientalis(L．Franco的干燥枝梢和叶；槲皮苷对照A为纵坐标，浓度C为横坐标，绘制标准曲线。得标 3C一0．003 品(中国食品药品检定研究院，批号111538—准曲线A=14．070 3，r=O．9997，线性范围 64—0．057 200504)；乙