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淀粉酶高产菌株86315的选育及其所产酶的基本性质.pdf
维普资讯
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研究报告)
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一 淀粉酶高产菌株86315的选育
及其所产酶的基本性质
王凤云 谷 军
(黑龙江省科学院应用微生物研究所,哈尔滨 )
周 云 洁
(连云港市酶制剂厂,连云港 )
近年来,对 n一淀粉酶产生菌的 选 育 l 、NgCl0.5 、蛋 白 胨 1 ,琼脂
国内外曾做了大量研究,并取得了重要进 2 ,p[-I7~O.1MPa蒸汽灭菌 3O分钟 。
展。我们 以淀粉酶生产菌BaciI1USsub- 3.茄子瓶斜面培养基:采用马铃薯
tiIjS209为 出发菌株 ,经物理和化 学 园 琼脂培养基 。去皮马铃薯 200克,切薄片
子的连续处理,获得~稳定高 产 的 菌株 加水煮沸 1小时,过滤定容至i000毫升,
8a5f2J。针对 8a5的缺点,继续进行诱变 加琼脂20克,硫 酸 镁 6毫 克, NaOH调
处理,获得 了蛋 白酶话性低,而 “一淀粉 pH6.7一T.O,O.1MPa蒸 汽 灭 菌 40分
酶稳定,高产的新诱变菌株 §6315。先后 钟 。
在生产厂家进行了间断大生产试验,平均 4.摇瓶种子培养基:玉米粉 3 ,
发酵酶活达到国内先进水平 。该菌株还具 豆饼粉 4 、NaHP0 ·12H:O0.8 、
有发酵周期短 ,耐热性强 以及生产 比较稳 NH C10.15 、 (NH;):SO 0.4 ,
定等特点。本文报告 86315莆种的选育及 pH自然。500毫升三角瓶分 装 5O毫 升,
生产性试验结果 。 o.1MPa蒸汽灭菌3O分钟。
5.摇瓶发酵培养基 玉米粉 9%、
材料与方法 豆饼粉 5%、NaHPO 、12H O0.8%、
(一 )出发菌株 (NH .)2SO 0.4 、 CaCI20.2 ,
Baci1IUs subtilis 8a5 NH c10.15 ,pH自然,500毫 升三角
(= )培养基和培养条件 瓶分装25毫升,0.tMPa蒸 汽 灭 菌 30分
1.肉汤培养基:牛 肉膏1%,蛋 白 钟,接种量 4 ,旋转式摇床37℃,培养
胨1%、NaC1o.5 ,pH7,0.1MPa蒸 48小 时。
汽灭菌3O分钟 。 6.种子罐培养基和培养条件:种子
2.斜面、平板分离培莽基 (淀粉琼 罐培养基 :玉米 粉 3 、豆 饼 粉 4 、
脂培养基 ):可溶性 淀 粉 1 ,牛 内 膏 Na2HPO ·12H 2O 0.8 、 N H C1
*本文部分工作蒋受匝豳 副研究员的指导,特致谢意。
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0.15 、 (N II ) SO 0.4 、 CaCI2 苗,充分摇匀做为原始孢予悬液。取息波
0.2 JpH 自然 。种子罐 2吨 ,定容 1.2吨 , 1O毫升于i00℃恒温水浴 锅 热 处 理 10分
罐压0.07MPa,培养温度 37℃ ±1℃,风 钟,做币同的稀释,涂布于淀粉 肉汤琼脂
量 比{0~ 8小时 l 0
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