腹腔注射鱼藤酮诱导大鼠帕金森模型的建立及评估.pdfVIP

．130． 华东地区第十三届实验动物科学学术交流会 腹腔注射鱼藤酮诱导大鼠帕金森模型的建立及评估 张昭强1，孙晓2 (1．泰山医学院生命科学学院动物实验研究室，山东泰安271000； 2．泰安市中心医院泌尿内二科，山东泰安271000) [摘要]目的探讨通过腹腔注射鱼藤酮建立更简便的、容易复制的大鼠帕金森模型的制作方法。方 法雄性Wistar大鼠随机分为鱼藤酮注射组、溶剂注射组和正常组。鱼藤酮注射组连续每日腹腔注射中链 甘油三酯乳化溶解的鱼藤酮(3mg·kgq)21d，溶剂组和正常组分别腹腔注射等量的溶剂和生理盐水。监 测各组大鼠体重的变化，比较三组大鼠行为学(竖起实验、方桥实验、旷场试验)、中脑黑质酪氨酸羟化酶 (tyrosine 测、中脑黑质TH的免疫活性和表达与另两组大鼠比较均出现显著性的改变(P0．05)；而溶剂注射组和正常 组大鼠体重显著增加，其他检测均未出现明显变化。此模型成功率为62．5％，死亡率为25％，12．5％的大鼠 对鱼藤酮不敏感。结论以3 功制作帕金森病大鼠模型，且该模型操作简便、费用少、成功率较高。 [关键词]鱼藤酮；帕金森病；腹腔注射；大鼠模型 7 帕金森病(ParkinsonS 为1％，患病人数超过600万人n]。其主要的病理变化是进行性的黑质致密带多巴胺能神经元的缺失，残留 神经元变性，胞质内出现特征性嗜酸性包涵体(Lewy小体)[2】。当今我们仍没有根治PD的治疗方法，具体 的发病机制也未完全阐明，然而有越来越多的证据表明环境中的有害物质是PD的重要致病因素之一【3]。 现今对PD的研究离不开慢性药物致PD的动物模型，包括灵长类的和啮齿类的动物，常用的致PD的药物 体I的活性，其极易穿透血脑屏障进人中枢神经系统并在边沿脑富集【5】。近年来，国内学者对此模型进行 研究时，多采用鱼藤酮皮下注射或静脉微量泵注射的造模方式，所用鱼藤酮剂量各不相同，造模方式较为复 杂，部分需要购买专用设备，成本较高。为了更好地模拟帕金森病的缓慢疾病进程，参考国外学者的报道和 我前期的研究结果，我们选用腹腔注射的方式建立拟PD的Wistar大鼠模型，较系统地评价了鱼藤酮不同 剂量对大鼠行为学及黑质酪胺酸羟化酶分布及表达的变化，探讨鱼藤酮腹腔注射制作PD大鼠模型的合适 的条件。 1材料和方法 1．1试剂和器材 鱼藤酮购自Sigma公司，中链甘油三酯(Medium．chain [作者简介】张昭强(1980一)，E-mail：zhangzhaoqian92005@163．tom 华东地区第十三届实验动物科学学术交流会 科技有限公司，Western．blot二抗购自SantaCruz公司，其余一般性化学药品购自天津四通化工厂。光学显 微镜成像系统为德国Leica公司产品，Western—blot检测系统为美国Bio—Rad公司产品。 1．2动物模型的制作 h：12h，自由取水进食。随机分为3组： d后用于实验。动物饲养室温度控制在23℃±3℃，光／暗周期为12 鱼藤酮组(Rotenone group，RG)，溶剂组(Vehiclegroup，VG)和正常组(Normalgroup，NG)。鱼藤酮注射液 使用100％的DMSO配置为50×的储存液，通过MCT配置为最终浓度为3．0 mg·mL～，含有98％MCT和2％ DMSO的工作液，不含鱼藤酮的工作液为溶剂。每周配置2～3次，避光保存。RG大鼠连续腹腔注射鱼藤 d(1 d(1 酮工作液21 mL·kg’。·d。)，NG大鼠连续腹腔注 mL·kg一·d。1)，VG大鼠连续腹腔注射溶剂21 射生理盐水21d(1 保存备用。 1．3行为学测试 1．3．1竖起实验大鼠置于新的陌生环境中，会竖起探索，其前肢在此过程中会接触圆筒的壁【6’7】。检测过程中 cm)5 将大鼠放置于干净的玻璃