五子衍宗软胶囊对精子内Ca2%2b浓度影响.pdfVIP

不育不孕症 丸显微取精术时，47例(64．4％)获得精子。病理学检查结果为支持细胞综合征型25例．其中10例 查到精子，精子成熟阻滞型21例，其中14例查找到精子，精子发生低下型27例。其中23例查到 精子。 【结论]NOA发病原因为睾丸衰竭，虽然其睾丸生精功能差。但患者睾丸中仍然可能存在局灶性精 子发生区域。怎样才能更准确地找到这些局灶性精子发生区域是近几年外科睾丸取精术的发展 精术不断发展，但是目前仍有很大一部分NOA患者无法找到精子。除了取精方法的不断改进外， 对现有的取精术进行有效的组合或许能提高NOA患者的精子获得率。在我们的研究中，我们将 够有效的提高患者精子获得率，其精子获得率与睾丸组织学类型相关．其中精子发生低下型精子 获得率较高。近期，RanjithRamasamy等将多光子显微镜检查(multiphoton 检测正常及低温、局部缺血等病理模型大鼠睾丸生精小管，发现只有支持细胞的生精小管在 显微取精术中。综合利用各种外科取精手段将会大大提高NOA患者的精子检出率。 【关键词】非梗阻性无精子症；睾丸细针抽吸术；睾丸活检术；显微取精术 五子衍宗软胶囊对精子内CaA浓度的影响 杨明陈立华陈经宝黄羽凌文浩 广东省中医院(510120) 【关键词】精子；Ca2+；五子衍宗软胶囊 五子衍宗丸出于唐代的”五子守仙丸”，至明代张时彻的《摄生众妙方》已成五子衍宗丸，沿用 至今已有千年历史，目前仍作为治疗不育症的药物使用并取得良好疗效，为探讨五子衍宗丸临床 作用原理，我们用上市药物五子衍宗软胶囊作为实验药物，研究五子衍宗软胶囊对人精子胞浆 Ca2+浓度的影响，了解药物，特别是常用治疗不育症的中药对体外精子的作用。 材料与方法： 一、材料： 1．精液标本：健康精液标本来源于本院男科门诊的健康供精者，禁欲3—7天后手淫取精液于 干燥消毒量杯内，置37℃水浴液化后进行常规精液分析，选精子活率≥60％，a+b级精子≥50％， 精子密度≥20x106／ml。精液量≥2ml的精液作为标本。 2．主要仪器和试剂：流式细胞仪(FCM，FC500型，美国贝克曼库尔特公司)，，钙离子荧光探针 Probe Flu03一AM(购自Molecular 子衍宗软胶囊(阿特维斯制药有限公司批号0907453)。 实验方法： 1．药物浓度的配制： -203- 不育不孕症 (1)中药仙茅、淫羊藿采用喷雾干燥粉末，用纯水配制三种浓度：①高浓度：相当于生药10mg／ lOOml，②中浓度：相当于生药5mg／100ml，③低浓度：相当于生药2．5mg／lOOml。 (2)黄体酮采用黄体酮注射液，加入纯水配制浓度：①高浓度20mg／ml，②中浓度10mg／“，③ 低浓度5mg／ml。 (3)五子衍宗软胶囊用注射器将胶囊内容物抽出后集中，用纯水稀释：①高浓度胶囊内容物： 纯水=1：l，②中浓度胶囊内容物：纯水=l：3，③低浓度胶囊内容物：纯水=1：7。 各浓度药液配置好后使用滤器滤掉沉渣。 2．精子的洗涤：生理盐水作为洗涤液：采集鲜精立即用等渗的生理盐水作4倍稀液，以368xg 离心2次，每次10rain，去除精浆。再加入4ml生理盐水混匀备用。 3．试剂的添加：各试管内分别加入200ul的精液，将精子悬液分为5组：空白组19例，胶囊组 24例，仙茅组24例，淫羊藿组24例，黄体酮组24例，在空白对照组中加入PBSlml；黄体酮、五子 衍宗软胶囊、仙茅、淫羊藿组分别加入高中低浓度黄体酮、五子衍宗软胶囊、仙茅、淫羊藿各lml。 混匀后．置37℃水浴箱内温育30min，吸取上层精子约200ul，调整精子浓度为2xlOE6／ml。 4．负载Flu03一AM的精子悬液的制备：取不同组及组中、不同浓度的精子悬液37℃水浴 D—PBS100 温育30 ul重悬精子沉