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RNA 干扰的研究进展及在神经科学上的应用研究 1 1 2 1 陈贵钱 , 胡秀芳 , 周卫东 , 谷昊 1浙江理工大学生物工程研究所，浙江杭州（310018 ） 2 浙江省农科院畜牧研究所，浙江杭州（310018 ） E-mail ：gqchen_123@ 摘 要：RNA 干扰是外源性或内源性双链 RNA 诱发的在 mRNA 水平上的进行的基因沉 默机制。具有高效性和特异性的特点。目前这种RNA干扰技术在生命科学的众多领域皆有 相关研究。本文就RNA 技术的研究发展以及在神经科学上的最新研究进展作一综述。 关键词：RNA 干扰，基因沉默，神经科学 引言 在多种生物体中，外源性或内源性的双链 RNA (double stranded RNA , dsRNA) 导入细 胞后，与 dsRNA 同源的 mRNA 会被降解，因而其相应的基因表达受到抑制，这是一种转 录后基因沉默的机制 (post transcriptional gene silencing, PTGS) 。其首先在线虫中发现并得 以证实。由于这是一种在 RNA 水平上进行的基因抑制表达的现象，故也称为 RNA 干扰 (RNA interference, RNAi)[1][2] 。RNA干扰一经发现，便在生命科学界的各个研究领域中有所 涉及。2002 年《Science》杂志将 RNA 干扰列为世界十大科学成就之首，对于 RNA 干扰 现象的研究和应用愈来愈受到生命科学家的青睐。 1. RNAi的发现 1990 年，为了加深花的颜色，Jorgensen 将紫色素基因导入矮牵牛花中，却发现花色不 仅没有加深，反而呈杂色甚至呈白色。这一现象这说明基因以及外源紫色素基因的表达被同 [2] 时抑制了，Jorgensen 称此现象为共抑制 。1994 年，Macino 和 Cogoni 在研究粗糙脉孢霉 转基因时，在真菌中发现了类似的现象，他们称之为基因压制。后来在植物以及其它真菌内 都有类似的发现，但都没有给出一个十分合理的解释，但这一现象却引起了众多科学家的兴 趣。1995 年，康奈尔大学的 Su Guo 博士在用反义 RNA 阻断线虫基因表达的试验中发现， 反义 RNA （anti sense RNA ）和正义RNA （sense RNA ）都阻断了基因的表达，他对这个 结果百思不得其解，对这个奇怪的现象,该研究小组一直未能给出合理解释。直到 1998 年， 华盛顿卡耐基研究院的 Andrew Fire 和马萨诸塞大学医学院的 Craig Mello，当他们将体外转 录得到的单链 RNA 纯化后注射线虫时发现，基因抑制效应变得十分微弱，而经过纯化的双 链 RNA 却正好相反，能够高效特异性阻断相应基因的表达。该小组将这一现象称为 RNA 干扰[3][4] （RNA interference ）。这也就证明了共抑制和基因压制现象都是由 dsRNA 所引起的。 但为了进一步的验证这种现象，科学家有把 dsRNA 浸泡在含有 dsRNA 的溶液中和给 [5] C.elegans 喂食能表达 dsRNA 的工程细菌等，结果都显示了dsRNA 的基因沉默表达现象 。 1999 年 Tuschl 等报道了在哺乳动物中也存在 RNAi 现象，只是导入的 RNA 是小干扰 RNA(siRNA) 。2001 年 Berstein 等提出:只有约 22nt RNA 才能特异性地阻断 dsRNA，同时他 们还发现了一个分解 ds