硅包覆上转换纳米晶制备与表征及生物特异性标记研究.pdfVIP

第30卷，第1期 光谱学与光谱分析 201 and 0年1月 SpectroscopySpectralAnalysis January，2010 硅包覆上转换纳米晶制备和表征及生物特异性标记研究 宋 凯1～，田利金1’2，孔祥贵H，刘开1’2，张庆彬1’2， 杜 创1’2，曾庆辉1，孙雅娟1，刘晓敏1 1．中国科学院长春光学精密机械与物理研究所激发态重点实验室，吉林长春130033 2．中国科学院研究生院，北京 100049 摘要 以NaWW4为代表的|：转换纳米晶作为细胞及组织标记的研究越来越热。但易团聚，水溶性、生物 兼容性差，没有与生物偶联官能团等缺点限制广其应用，因而表面修饰显得尤为萤要。作者通过水热和共沉 淀相结合方法，制备了NaYF4：Yb3+，Er3+上转换纳米晶，并对其包覆二氧化硅壳层。SEM表征硅包覆前 后分别为25和250咖的单分散粒子，说明硅已成功地包覆于纳米晶表面。980m激光照射下，样品的 PBS胶体溶液旱可视七转换绿光。上转换荧光光谱和寿命均表明二氧化硅壳层对其发光性质影响很小。圆 二色谱说明蛋白分子通过戊二醛与纳米晶偶联前后的二级结构基本不变。基于硅片上的抗原抗体荧光免疫 识别试验进一步验证r偶联蛋白分子的特异性，表明该上转换纳米晶适合于生物标记。 关键词 七转换；硅包覆；生物偶联；免疫荧光成像 中图分类号：0472．3文献标识码：A 引 言 1实验部分 发光上转换纳米晶是一类在长波长光激发下发射短波长 1．1试剂和仪器 光的材料，与传统的染料比较，上转换荧光探针具有高灵敏 硝酸钇、硝酸铒、硝酸镱为自制；戊二醛、正硅酸乙酯 性、抗漂白、不受环境影响(比如pH值、温度)，弱的激发散 射光和尤自身荧光等优点，应用于生物标记中，可以大大提 高检测灵敏度和线性范围Ll。5J。然而在实际应用中，各种方术公司。其他试剂均为分析纯，购于北京化工厂。 法制备的上转换纳米晶往往冈表面配体分子的性质，不足以 应用Hitachi LabRam 使其获得理想的水溶性、单分散性和生物兼容性。因此，对 表征。Jobin-YvonRaman共聚焦光谱仪采集上转换 上转换纳米晶的进一步表面修饰成为目前的研究热点。 光谱，光源为980nlTl半导体激光器。荧光寿命测量采用具 ns脉冲宽度的10 nm(OPO调 有3～6 MHz重复频率的980 本文通过对NaYF4：Yb3+，E矿发光上转换纳米晶的 二氧化硅包覆，利用硅烷化试剂的多样性以及所带配体的可 谐产生，调谐范围445l750 控性，使硅层表面修饰的化学基团与生物分子共价偶联。硅 包覆修饰后纳米晶的卜转换发光性质不变，发光效率略有提 仪。 高；与蛋白分子共价偶联后，纳米晶包硅表面对生物分子的 1．2发光上转换纳米晶的制备及二氧化硅包覆 构象影响非常小。通过模式的抗原抗体反应，成功地实现r 将硝酸钇、硝酸铒、硝酸镱按78／20／2的摩尔比溶于8 蛋白分子的特异性标记检测。 mL去离子水中，待溶解透明后，加入等量的EDTA并氨水 调节pH值至形成透明的稀土螯合物。2mL曲拉通100滴人 20 mL乙二醇，加入3mL氢氟酸作为氟源搅拌30m_in。将